Reagenzien für die Gelelektrophorese

SafeGel red stain ist ein äußert sensitiver Fluoreszenzfarbstoff zum Färben von Nukleinsäuren, der das toxische, keimbahnmutagene Ethidiumbromid (EtBr) zum Färben von dsDNA, ssDNA oder RNA in Agarose- oder Polyacrylamidgelen ersetzt. SafeGel red stain ist viel empfindlicher als EtBr, ohne dass ein Entfärbeschritt benötigt wird. SafeGel red stain ist weniger toxisch und weniger mutagen als EtBr wobei beide praktisch dasselbe UV-Spektrum zeigen, so dass man EtBr direkt ersetzen kann, ohne existierende Imagingsysteme ersetzen zu müssen. SafeGel red stain kann dazu benutzt werden, dsDNA, ssDNA oder RNA mittels pre-staining oder post-staining in Agarosegelen > zu färben. PAGE-Gele können nur mit dem post-staining Verfahren angefärbt werden. SafeGel red stain stört auch eine weitergehende Verarbeitung der DNA, wie Restriktionverdaus, Southernblots oder Klonierungen nicht. Die Ergebnisse des Ames-Tests bestätigen, dass der Farbstoff für Latexhandschuhe und Zellmembranen undurchdringlich ist. Bei Verwendung der empfohlenen Arbeitskonzentrationen bei der Gelfärbung ist der rote Gelfarbstoff nachweislich nicht in der Lage, Zellmembranen zu durchdringen, und er ist bei Arbeitskonzentrationen nicht zytotoxisch und nicht mutagen. Eine Serie von Sicherheitstests hat gezeigt, dass SafeGel red stain bei Verwendung der empfohlenen Arbeitskonzentrationen hinaus nicht giftig, nicht mutagen und nicht gefährlich ist. Als ein Resultat daraus kann der Fluoreszenzfarbstoff mit dem normalen Abfall entsorgt werden und spart damit neben dem separaten Handling des EtBr-Abfalls auch noch merklich an Entsorgungskosten. Der Fluoreszenzfarbstoff SafeGel red stain wird als 10,000X Lösung in Wasser geliefert. Diese Lösung kann direkt zum post-staining eingesetzt werden. Es hat sich gezeigt, dass die besten Ergebnisse erzielt werden, wenn der Farbstoff direkt mit der DNA in den Gelslot pipettiert wird. Lesen Sie auch in unserem Blogbeitrag, warum Sie jetzt Genaxxons SafeGel testen sollten. Für erstklassige Agarosegele bieten wir unsere Standard Agarose LE >, oder auch unsere Spezialagarosen mit hoher Auflösung Tiny (M3046) > oder Tiny HT (M3047) > an. * * *Discover our NEW Product: More Info PDF >

SafeGel green stain ist ein äußert sensitiver Fluoreszenzfarbstoff zum Färben von Nukleinsäuren, der das toxische, keimbahnmutagene Ethidiumbromid (EtBr) zum Färben von dsDNA, ssDNA oder RNA in Agarose- oder Polyacrylamidgelen ersetzt. SafeGel green stain ist viel empfindlicher als EtBr, ohne dass ein Entfärbeschritt benötigt wird. SafeGel red stain ist weniger toxisch und weniger mutagen als EtBr und kann mit Blau/Grünlicht bei 480-530nm angeregt werden. SafeGel green stain kann dazu benutzt werden, dsDNA, ssDNA oder RNA mittels pre-staining oder post-staining in Agarosegelen > zu färben. SafeGel green stain stört auch eine weitergehende Verarbeitung der DNA, wie Restriktionverdaus, Southernblots oder Klonierungen nicht. Die Ergebnisse des Ames-Tests bestätigen, dass der Farbstoff für Latexhandschuhe und Zellmembranen undurchdringlich ist. Bei Verwendung der empfohlenen Arbeitskonzentrationen bei der Gelfärbung ist der rote Gelfarbstoff nachweislich nicht in der Lage, Zellmembranen zu durchdringen, und er ist bei Arbeitskonzentrationen nicht zytotoxisch und nicht mutagen. Eine Serie von Sicherheitstests hat gezeigt, dass SafeGel green stain bei Verwendung der empfohlenen Arbeitskonzentrationen hinaus nicht giftig, nicht mutagen und nicht gefährlich ist. Als ein Resultat daraus kann der Fluoreszenzfarbstoff mit dem normalen Abfall entsorgt werden und spart damit neben dem separaten Handling des EtBr-Abfalls auch noch merklich an Entsorgungskosten. Der Fluoreszenzfarbstoff SafeGel green stain wird als 10,000X Lösung in Wasser geliefert. Diese Lösung kann direkt zum post-staining eingesetzt werden. Es hat sich gezeigt, dass die besten Ergebnisse erzielt werden, wenn der Farbstoff direkt mit der DNA in den Gelslot pipettiert wird. Für erstklassige Agarosegele bieten wir unsere Standard Agarose LE >, oder auch unsere Spezialagarosen mit hoher Auflösung Tiny (M3046) > oder Tiny HT (M3047) > an. * * *Discover our NEW Product: More Info PDF >

GelRed(TM) ist ein ultrasensitiver, extrem stabiler Fluoreszenzfarbstoff zum Färben von Nukleinsäuren, der das toxische, keimbahnmutagene Ethidiumbromid (EtBr) zum Färben von dsDNA, ssDNA oder RNA in Agarose- oder Polyacrylamidgelen ersetzt. GelRed(TM) ist viel empfindlicher als EtBr, ohne dass ein Entfärbeschritt benötigt wird. GelRed(TM) ist weniger toxisch und weniger mutagen als EtBr wobei beide praktisch dasselbe UV-Spektrum zeigen, so dass man EtBr direkt ersetzen kann, ohne existierende Imagingsysteme ersetzen zu müssen. GelRed(TM) kann dazu benutzt werden, dsDNA, ssDNA oder RNA mittels pre-staining oder post-staining in Agarosegelen > zu färben. PAGE-Gele können nur mit dem post-staining Verfahren angefärbt werden. GelRed(TM) stört auch eine weitergehende Verarbeitung der DNA, wie Restriktionverdaus, Southernblots oder Klonierungen nicht. Eine Serie von Sicherheitstests hat gezeigt, dass GelRed(TM) weit über die verwendeten Dosen hinaus nicht giftig, nicht mutagen und nicht gefährlich ist. Als ein Resultat daraus kann der Fluoreszenzfarbstoff mit dem normalen Abfall entsorgt werden und spart damit neben dem separaten Handling des EtBr-Abfalls auch noch merklich an Entsorgungskosten. Der Fluoreszenzfarbstoff GelRed(TM) wird als 10,000X Lösung in Wasser geliefert. Diese Lösung kann direkt zum post-staining eingesetzt werden. Für Kunden, die eine kostengünstige Großpackung suchen, bieten wir GelRed(TM) auch als 10mL-Lösung (10000X in Wasser) an. Für erstklassige Agarosegele bieten wir unsere Standard Agarose LE >, oder auch unsere Spezialagarosen mit hoher Auflösung Tiny (M3046) > oder Tiny HT (M3047) > an.

Ethidiumbromid zählt als DNA-Interkalator zu den karzinogenen Substanzen. Um die Möglichkeit, mit dieser Substanz direkt in Kontakt zu kommen, weiter zu reduzieren, bietet Genaxx Ethidiumbromid als ready-to-use Lösung in der 'dropper bottle' an. Die Konzentration der Ethidiumbromid-Lösung ist mit 0,7mg/mL so eingestellt, dass die Zugabe von einem Tropfen (Volumen: 50 μL) dieser Lösung ausreicht, um ein 50mL Agarosegel zu färben.

TAE-Puffer ist der gängigste Laufpuffer für Agarosegele. Ursprünglich wurde der Puffer für die Polyacrylamidgelelektrophorese, mit leicht unterschiedlicher Pufferzusammensetzung entwickelt (40mM Tris; 20mM NaOAc; 2mM EDTA-Na2; pH7.8). Um die Sekundärstruktur von RNA zu stabilisieren, wurde Natriumacetat benutzt.  Heutzutage wird TAE in einer modifizierten Zusammensetzung (40mM Tris-acetate; 1mM EDTA-Na2; pH ca. 8.5 at room temperature). TAE besitzt eine geringere Pufferkapazität als TBE, aber doppelsträngige, lineare DNA bewegt sich ca. 10% schneller bei TAE-Puffer als bei TBE-Puffer bei gleichzeitig vergleichbarer Auftrennung. Die Auftrennung von supercoiled DNA ist in TAE besser als in TBE. Durch die geringere Pufferkapazität wird TAE-Puffer über die Zeit bei hohen Strömen ausgelaugt und muss daher immer wieder ersetzt werden. Ein großer Vorteil von TAE gegenüber TBE ist in der fehlenden Interaktion mit Agarose zu sehen, was zu einer höheren Ausbeute an Nukleinsäure in präparativen Agarosegelen führt.  Normalerweise wird TAE als 50-fach Konzentrat hergestellt und als 1-fach oder 0,5-fach konzentrierte Lösung in der Elektrophorese eingesetzt.

TAE-Puffer ist der gängigste Laufpuffer für Agarosegele. Ursprünglich wurde der Puffer für die Polyacrylamidgelelektrophorese, mit leicht unterschiedlicher Pufferzusammensetzung entwickelt (40mM Tris; 20mM NaOAc; 2mM EDTA-Na2; pH7.8). Um die Sekundärstruktur von RNA zu stabilisieren, wurde Natriumacetat benutzt.  Heutzutage wird TAE in einer modifizierten Zusammensetzung (40mM Tris-acetate; 1mM EDTA-Na2; pH ca. 8.5 at room temperature). TAE besitzt eine geringere Pufferkapazität als TBE, aber doppelsträngige, lineare DNA bewegt sich ca. 10% schneller bei TAE-Puffer als bei TBE-Puffer bei gleichzeitig vergleichbarer Auftrennung. Die Auftrennung von supercoiled DNA ist in TAE besser als in TBE. Durch die geringere Pufferkapazität wird TAE-Puffer über die Zeit bei hohen Strömen ausgelaugt und muss daher immer wieder ersetzt werden. Ein großer Vorteil von TAE gegenüber TBE ist in der fehlenden Interaktion mit Agarose zu sehen, was zu einer höheren Ausbeute an Nukleinsäure in präparativen Agarosegelen führt.  Normalerweise wird TAE als 50-fach Konzentrat hergestellt und als 1-fach oder 0,5-fach konzentrierte Lösung in der Elektrophorese eingesetzt.

Gebrauchsfertiges 50-fach TAE-Pulver für 500mL/1000mL Pufferlösung mit pH8,3. Den Inhalt eines Beutels in 500mL/1000mL demineralisiertem Wasser gelöst ergibt: 2,0M Tris-Acetatpuffer, 0,05M EDTA, pH8,3 bei 25°C. TAE-Puffer ist der gängigste Laufpuffer für Agarosegele. Ursprünglich wurde der Puffer für die Polyacrylamidgelelektrophorese, mit leicht unterschiedlichem Puffer entwickelt (40mM Tris; 20mM NaOAc; 2mM EDTA-Na2; pH7.8). Um die Sekundärstruktur von RNA zu stabilisieren, wurde Natriumacetat benutzt.  Heutzutage wird TAE in einer modifizierten Zusammensetzung (40mM Tris-acetate; 1mM EDTA-Na2; pH ca. 8.5 at room temperature). TAE besitzt eine geringere Pufferkapazität als TBE, aber doppelsträngige, lineare DNA bewegt sich ca. 10% schneller bei TAE-Puffer als bei TBE-Puffer > bei gleichzeitig vergleichbarer Auftrennung. Die Auftrennung von supercoiled DNA ist in TAE besser als in TBE. Durch die geringere Pufferkapazität wird TAE-Puffer über die Zeit bei hohen Strömen ausgelaugt und muss daher immer wieder ersetzt werden. Ein großer Vorteil von TAE gegenüber TBE ist in der fehlenden Interaktion mit Agarose zu sehen, was zu einer höheren Ausbeute an Nukleinsäure in präparativen Agarosegelen führt.  Normalerweise wird TAE als 50-fach Konzentrat hergestellt und als 1-fach oder 0,5-fach konzentrierte Lösung in der Elektrophorese eingesetzt.