SafeGel green stain für die DNA Elektrophorese
Vorteile im Überblick
- Sicherer als EtBr
- Einfache Entsorgung
- Ultra-empfindlich: Viel empfindlicher als EtBr
- Extrem stabil
- Perfekt kompatibel mit einem Standard-UV-Transilluminator
Lieferzeit: 3 - 8 Werktage
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SafeGel green stain ist ein äußert sensitiver Fluoreszenzfarbstoff zum Färben von Nukleinsäuren, der das toxische, keimbahnmutagene Ethidiumbromid (EtBr) zum Färben von dsDNA, ssDNA oder RNA in Agarose- oder Polyacrylamidgelen ersetzt. SafeGel green stain ist viel empfindlicher als EtBr, ohne dass ein Entfärbeschritt benötigt wird. SafeGel red stain ist weniger toxisch und weniger mutagen als EtBr und kann mit Blau/Grünlicht bei 480-530nm angeregt werden. SafeGel green stain kann dazu benutzt werden, dsDNA, ssDNA oder RNA mittels pre-staining oder post-staining in Agarosegelen > zu färben. SafeGel green stain stört auch eine weitergehende Verarbeitung der DNA, wie Restriktionverdaus, Southernblots oder Klonierungen nicht.
Die Ergebnisse des Ames-Tests bestätigen, dass der Farbstoff für Latexhandschuhe und Zellmembranen undurchdringlich ist. Bei Verwendung der empfohlenen Arbeitskonzentrationen bei der Gelfärbung ist der rote Gelfarbstoff nachweislich nicht in der Lage, Zellmembranen zu durchdringen, und er ist bei Arbeitskonzentrationen nicht zytotoxisch und nicht mutagen.
Eine Serie von Sicherheitstests hat gezeigt, dass SafeGel green stain bei Verwendung der empfohlenen Arbeitskonzentrationen hinaus nicht giftig, nicht mutagen und nicht gefährlich ist. Als ein Resultat daraus kann der Fluoreszenzfarbstoff mit dem normalen Abfall entsorgt werden und spart damit neben dem separaten Handling des EtBr-Abfalls auch noch merklich an Entsorgungskosten. Der Fluoreszenzfarbstoff SafeGel green stain wird als 10,000X Lösung in Wasser geliefert. Diese Lösung kann direkt zum post-staining eingesetzt werden. Es hat sich gezeigt, dass die besten Ergebnisse erzielt werden, wenn der Farbstoff direkt mit der DNA in den Gelslot pipettiert wird.
Für erstklassige Agarosegele bieten wir unsere Standard Agarose LE >, oder auch unsere Spezialagarosen mit hoher Auflösung Tiny (M3046) > oder Tiny HT (M3047) > an.
- Reduzieren Sie die Menge der geladenen DNA um die Hälfte bis ein Drittel. Verschmierte Banden können durch Überladung verursacht werden. Dies wird häufig bei DNA-Leitern beobachtet.
- Führen Sie ein Post-Staining durch.
- Gießen Sie ein Agarosegel mit geringerem Prozentsatz, um große Fragmente besser aufzulösen.
- Wechseln Sie den Laufpuffer. TBE-Puffer hat eine höhere Pufferkapazität als TAE.
- SDS-haltige Ladepuffer können zum Verschmieren der Banden beitragen. Verwenden Sie in diesem Fall das Post-Staining-Protokoll für Anwendungen, die SDS-haltige Ladepuffer erfordern.
- Reduzieren Sie die Menge der geladenen DNA um die Hälfte bis ein Drittel.
- Reduzieren Sie die Menge des verwendeten Farbstoffs, d. h. verwenden Sie 0,5X in vorgefertigten Gelen.
- Färben Sie das Gel nachträglich mit 3X SafeGel, um zu verhindern, dass der Farbstoff die Migration während der Elektrophorese beeinträchtigt.
- Erhitzen Sie SafeGel zwei Minuten lang auf 45-50 °C und schütteln Sie die Lösung.
- Lagern Sie den Farbstoff bei Raumtemperatur, um Ausfällungen zu vermeiden.
Specifications:
10000 times concentrated solution in water.
Blue/Green excitation at 480nm to 530nm but also useable
with a standard transilluminator (254nm to 366nm)
SafeGel can also be used to stain dsDNA, ssDNA or RNA however SafeGel is twice as sensitive to dsDNA than ssDNA or RNA.
Sicherheits Hinweise / Safety
Klassifizierungen / Classification
eclass-Nr: 32-16-04-03
Dokumente:
DatenblätterQuelle: NCBI PubMed