Plant DNA Q-Extraction Solution

Die ungiftige Plant DNA Q-Extraction-Lösung ermöglicht eine schnelle und einfache Extraktion von Nukleinsäuren aus verschiedenem Pflanzenmaterial (z. B. Efeu oder Brennnessel). Die PCR-fähige Nukleinsäure wird einfach in einem 1,5mL Reaktionsgefäß mit 100µL der Plant DNA Q-Extraktionslösung versetzt und in nur 8 Minuten extrahiert.

Die einstufige Lyse wird entweder in einem Thermocycler oder einem Heizblock durchgeführt und ist in zwei einfache Heizschritte unterteilt. Die extrahierte DNA ist dann ohne weitere Behandlung wie Vortexen, Zentrifugieren oder Verdünnen für die PCR bereit. Der erhaltene DNA-Extrakt ist bei -20°C bis zu einer Woche und bei -80°C für die Langzeitlagerung stabil.

Für optimale Genotypisierungsergebnisse empfehlen wir die Verwendung unserer Plant DNA Q-Extraktionslösung zusammen mit unserem Red Mastermix Master Mix (2X) (M3029) oder unserem SuperHot Mastermix Blue (2X) (M3007b) für die nachfolgende PCR. Von der extrahierten Lösung können direkt, z.B. 2µL bis 5µL für eine 25µL PCR-Reaktion eingesetzt werden.

Features:
- One-reagent set-up
- Minimal handling
- Rapid 8-minute protocol
- PCR-ready DNA
- no sample / yield loss
- DNA extracts from plants
- Non-toxic reagents
- Scalable set-up
- Automation-friendly

Extraktionsprotokoll
Die Präparation von DNA sollte in einem von der PCR getrennten Raum (Areal) erfolgen.

1. Auftauen der Plant DNA Q-Extraction Solution.
Beim ersten Mal sollte die Plant DNA Q-Extraction Lösung in kleinere Aliquots pipettiert werden, um die Anzahl der Einfrier- und Auftauzyklen pro Aliquot zu minimieren (Die Plant DNA Q-Extraction Solution ist eine milchig erscheinende Lösung).
2. Platzieren Sie die Pflanzenprobe in einem 1,5mL Reaktionsgefäß, das mit 100µL Plant DNA Q-Extraction Solution befüllt ist. Die von uns empfohlene Probenmenge finden Sie in der Tabelle des Datenblatts.
3. Das geschlossene Reaktionsgefäß, das die Pflanzenprobe und die DNA Extraktionslösung enthält, für 15 Sekunden vortexen. Bitte darauf achten, dass das gesamte Pflanzenmaterial mit Plant DNA Q-Extraction Solution bedeckt ist.
4. Platzieren Sie das Reaktionsgefäß in einem Thermoblock oder einem Thermocycler und inkubieren Sie bei 

1. 65 °C für 6 min
2. 98 °C für 2 min
3. 4 °C (oder Abkühlen auf Eis).

Der DNA-Extrakt ist nun fertig für die PCR / realtime PCR.

Anwendungsbeispiele:

Effiziente Amplifikation von DNA-Extraktion aus verschiedenen Pflanzengeweben (Blätter).

Plant DNA Q-Extraction Solution wurde zusammen mit unserem RedMastermix (M3029) zur Extraktion und Amplifikation genomischer DNA aus verschiedenen Pflanzengeweben verwendet. Für die DNA-Extraktion wurde jeweils 10mg Blattgewebe zu 100µL DNA Q-Extraction Solution hinzugefügt.

Figure 1: DNA extracts of stinging neetle and ivy. PCR tubes in duplicate with 100µL DNA Q Extract Solution + 10mg leave material from either stinging neetles or ivy. A. stinging neetle and B. Ivy before extraction with DNA Q Extraction Solution. C. stinging neetle and D. Ivy after extraction with DNA Q Extraction Solution.

Figure 2. The extracted DNA from ivy was amplified using RedTaq MasterMix 2X (M3029) and two primer sets targeting: A. Genomic plant DNA (ITS 335 bp) or B. Chloroplast DNA (trnL 380 bp). The positive controls are 1ng/reaction of DNA purified from stinging nettle using DNeasy Plant Mini Kit (Qiagen). Also included are duplicates of samples extracted in buffer without lysing agents, but using the Plant DNA Q-Extraction solution protocol (No treatment). All DNA extracts are amplified in duplicates. DNA marker is Iqon PCR Ladder.