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Proteinase K Pulver - PCR tauglich

Vorteile im Überblick

  • Unspezifische Serinprotease mit verschiedenen Anwendungsmöglichkeiten (Vorbereitung von chromosomaler DNA für PFGE, Abbau von Nukleasen, Isolation genomischer DNA)
  • Sehr hohe Reinheit
  • Hohe Aktivität
  • Aktiv unter denaturierenden Bedingungen
  • Erhältlich als Pulver oder Lösung mit verschiedenen Aktivitätsbereichen

Anzahl Stückpreis
Bis 5
45,00 €*
Bis 10
38,75 €*
45,00 €* (13.89% gespart)
Ab 11
33,75 €*
45,00 €* (25% gespart)
Gewicht
Produktnummer: M3036.0100
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Shipment: not cooled. Store at -20°C. For laboratory usage only!
Produktinformationen "Proteinase K Pulver - PCR tauglich"

Überblick

Proteinase K ist eine robuste und vielseitige Serinprotease, die in der Molekularbiologie häufig für den Verdau von Proteinen in Nukleinsäurepräparaten verwendet wird. Diese Lösung in einer Konzentration von 20 mg/ml ist ideal für eine Vielzahl von Anwendungen, einschließlich der Vorbereitung von DNA- und RNA-Proben. Die PCR-Qualität stellt sicher, dass das Enzym frei von Verunreinigungen ist, die nachgeschaltete Anwendungen beeinträchtigen könnten, so dass es sich hervorragend für empfindliche Techniken wie die PCR eignet.

Produkt-Details

  • ready-to-use
  • Konzentration: 20 mg/mL
  • Aktiv über einen weiteren Bereich von Reaktionsbedingungen.
  • Eine Erhöhung der Reaktionstemperatur von 37°C auf 50 - 60°C kann die Aktivität um ein Vielfaches erhöhen.

Qualität

  • PCR-Qualität, die eine hohe Reinheit und keine Interferenz mit PCR-Reaktionen gewährleistet.

Anwendungen

  • Geeignet für die DNA- und RNA-Extraktion
  • Entfernung von Proteinverunreinigungen
  • Vorbereitung von Proben für verschiedene molekularbiologische Techniken. 

Vorteile

  • Hohe Reinheit: Die PCR-Qualität garantiert minimale Verunreinigungen und sorgt für zuverlässige Ergebnisse bei empfindlichen Anwendungen.
  • Vielseitig einsetzbar: Ideal für verschiedene molekularbiologische Verfahren, einschließlich der Probenvorbereitung für die PCR.
  • Einfache Anwendung: Gebrauchsfertige Lösung in optimaler Konzentration für eine einfache Anwendung.

Zusätzliche Bemerkungen

  • Die empfohlene Arbeitskonzentration von Proteinase K beträgt 0,05 bis 1 mg/mL.
  • Die Aktivität des Enzyms wird durch 0,2 bis 1 % SDS und auch durch 1 bis 4 M Harnstoff stimuliert.
  • Ca2+ schützt Proteinase K vor Autolyse und erhöht die thermische Stabilität
  • Stabil über einen weiten pH-Bereich: 4,0 bis 12,5, optimaler pH-Wert 7,5 bis 8,0
  • Aktivitätsoptimum: 50°C bis 55°C
  • Bei Temperaturen über 65°C tritt eine schnelle Denaturierung des Enzyms ein. 

Merkmale

  • Keine nachgewiesene Exonuklease-, Endonuklease- oder RNase-Aktivität
  • Spezifische Aktivität: ≥40 units/mg protein
  • Aktivität: ≥30 units/mg
  • Löslichkeit: ≥20 mg/mL
  • DNA-Gehalt ≤10 pg/mL
  • Versandbedingungen: wird gekühlt verschickt

Proteinase K kann von Genaxxon als Pulver (M3036 >) oder als 20mg/mL Lösung (M3037 >) bezogen werden.

Hergestellt von der Genaxxon bioscience GmbH, die 2002 von Dr. Norbert Tröndle gegründet wurde, um zuverlässige Produkte für PCR und kundenspezifische Zellkulturmedienformulierungen anzubieten, bietet die Proteinase K Solution 20 mg/mL eine zuverlässige und effiziente Lösung für Ihre molekularbiologischen Anforderungen. Erzielen Sie konsistente, hochwertige Ergebnisse mit einem Enzym, das speziell für Ihre Anforderungen entwickelt wurde.

Specifications:
Appearance: white lyophilisate
Activity: >30 AnsonU/mg protein (>30 units/mg)
DNAses and RNAses: not detectable
Solubility: easily soluble in water
pH (1% H2O, 20°C): 6.2 - 6.8
MW = ca. 27,000 g/mol.


Applikation / Application:
Protein digest in DNA samples Isolation of genomic DNA from mouse tails Isolation of genomic DNA from cell cultures

Einheiten / Units:
Activity: >30 U/mg lyophilizate. Specific activity: >40 U/mg protein. One unit is definded as the enzyme acitivity which liberates folin-positive amino acids and peptides corresponding to 1 µmol tyrosine in 1 minute at 37°C using haemoglobin as substrate.

Quelle / Source:
Tritirachium album


Sicherheits Hinweise / Safety

H-Sätze: H315, H319 ,H334, H335
GHS-Symbole: GHS07, GHS08


Klassifizierungen / Classification

EC-Nr: 254-457-8
CAS-Nr: 39450-01-6
eclass-Nr: 32-16-04-10
Dokumente - Protokolle - Downloads :
Hier finden Sie Informationen und weiterführende Literatur. Für weitere Dokumente (Zertifikate mit weiteren Lotnummern, Sicherheitsdatenblätter in anderer Sprache, weitere Produktinformationen) wenden Sie sich bitte an Genaxxon biosience unter: info@genaxxon.com oder Tel.: +49 731 3608 123.


Dokumente:

Sicherheitsdatenblätter
Zertifikate
Produktbeschreibung
Allg. Daten 1
Hier finden Sie Artikel und Literaturzitate, in denen die Autoren auf die hohe Qualität dieses Genaxxonprodukts vertrauen.
Quelle: NCBI PubMed

Decreased Enhancer-Promoter Proximity Accompanying Enhancer Activation
Nezha S. Benabdallah, Iain Williamson, Robert S. Illingworth, Lauren Kane, Shelagh Boyle, Dipta Sengupta, Graeme R. Grimes, Pierre Therizols, Wendy A. Bickmore
Mol Cell. 2019 Nov 7; 76(3): 473–484.e7.
doi: 10.1016/j.molcel.2019.07.038
PMCID: PMC6838673

Glucocorticoid Receptor Binding Induces Rapid and Prolonged Large-Scale Chromatin Decompaction at Multiple Target Loci
Alasdair W. Jubb, Shelagh Boyle, David A. Hume, Wendy A. Bickmore
Cell Rep. 2017 Dec 12; 21(11): 3022–3031.
doi: 10.1016/j.celrep.2017.11.053
PMCID: PMC5745231

Enhancer turnover is associated with a divergent transcriptional response to glucocorticoid in mouse and human macrophages
Alasdair W Jubb, Robert S Young, David A Hume, Wendy A Bickmore
J Immunol. 2016 Jan 15; 196(2): 813–822.
doi: 10.4049/jimmunol.1502009
PMCID: PMC4707550

Active promoters give rise to false positive ‘Phantom Peaks’ in ChIP-seq experiments

Dhawal Jain, Sandro Baldi, Angelika Zabel, Tobias Straub, Peter B. Becker
Nucleic Acids Res. 2015 Aug 18; 43(14): 6959–6968. 
doi: 10.1093/nar/gkv637
PMCID: PMC4538825

ISWI Remodelling of Physiological Chromatin Fibres Acetylated at Lysine 16 of Histone H4

Henrike Klinker, Felix Mueller-Planitz, Renliang Yang, Ignasi Forné, Chuan-Fa Liu, Lars Nordenskiöld, Peter B. Becker
PLoS One. 2014; 9(2): e88411. 
doi: 10.1371/journal.pone.0088411
PMCID: PMC3916430

PRC1 and PRC2 Are Not Required for Targeting of H2A.Z to Developmental Genes in Embryonic Stem Cells

Robert S. Illingworth, Catherine H. Botting, Graeme R. Grimes, Wendy A. Bickmore, Ragnhild Eskeland
PLoS One. 2012; 7(4): e34848. 
doi: 10.1371/journal.pone.0034848
PMCID: PMC3322156

HP1 Binding to Chromatin Methylated at H3K9 Is Enhanced by Auxiliary Factors

Ragnhild Eskeland, Anton Eberharter, Axel Imhof
Mol Cell Biol. 2007 Jan; 27(2): 453–465. 
doi: 10.1128/MCB.01576-06
PMCID: PMC1800810


Application tipps
dissolve Proteinase K (20mg/mL) in water or in 50mM Tris/HCl (pH8.0), 1.5mM Ca-Acetate.

Following some application examples based on 20mg/mL concentrations of Proteinase K dissolved in pure water or 50mM Tris, pH8.0.

Standard reaction buffer: 
Cell lysis: 50 mM Tris-HCl (pH 7.5); 5 mM CaCl2; 0.5 % SDS.
DNA purification: 100 mM Tris-HCl (pH 8.0); 50 mM EDTA, 500 mM NaCl.

Some Application Protocols:
Isolation of genomic DNA from mammal cells
(3h, 50°C) 10mM Tris/HCl (pH8.0), 100mM EDTA (pH8.0), 50mM NaCl, 0.5%SDS, 20µg/mL DNase free RNase, 100µg/mL proteinase K.
Isolation of genomic DNA from mice tails
(overnight, 55°C) 20mM Tris/HCl (pH8.0), 5mM EDTA (pH8.0), 400mM NaCl, 1% SDS, 400µg/mL proteinase K.
Rapid isolation of genomic DNA as a PCR-template from cell cultures
(1h, 37 °C) 67mM Tris/HCl (pH8.8), 16.6mM ammonium sulfate, 5mM β-mercaptoethanol, 6.7mM MgCl2, 6.7µM EDTA (pH8.0), 1.7µM SDS, 50µg/mL proteinase K.
Preparation of DNA for PFGE, lysis in agarose block
(approx. 20h, 50°C). 100mM EDTA (pH8.0), 1 mM Tris/HCl (pH7.6), 20mM NaCl, 1% sarcosyl, 100µg/mL proteinase K.
Purification of mRNA prior to cDNA synthesis (leads often to an increase in cDNA yield)
(1-2h, 37°C) 100mM Tris/HCl (pH7.5), 10mM EDTA (pH8.0), 50mM NaCl, 0.1% SDS, 5µg/mL proteinase K.
Purification of PCR-reactions prior to cloning
(overnight, 55°C) PCR-reaction + 10mM Tris/HCl (pH8.0), 5mM EDTA (pH8.0), 400mM NaCl, 1% SDS, 400µg/mL proteinase K.
Purification of plasmid-DNA prior to in vitro transcription
(1h, 37°C) Plasmid-DNA + 21mM Tris/HCl (pH8.0), 5mM EDTA (pH8.0), 50mM NaCl, 0.5% SDS, 100µg/mL proteinase K.
RNase inactivation in ribonuclease-protection-assays
(30 min, 37°C) 30µL RNA/RNA-hybridisation mix + 300µL RNase digestion mix + 0.6% SDS, 300µg/mL proteinase K.
Inactivation of DNase in transcription-run-on-assays
(30 min, 42°C) Suspension of nuclei in 36mM Tris/HCl (pH7.4), 17mM MgCl2, 0.7mM CaCl2, 170mM NaCl, 13mM EDTA (pH8.0), 0.5% SDS with DNase, 100µg/mL proteinase K.
Denaturation of alkaline phosphatase when cipping vector DNA
(30 min, 56°C) 1 x dephosphorylation buffer + 0.5% SDS, 5mM EDTA (pH8.0), 100µg/mL proteinase K.