AQ97 Hot Start High Fidelity proofreading Polymerase
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AQ97 Hot Start High Fidelity DNA Polymerase ist eine proofreading Polymerase mit hoher Amplifikationsgeschwindigkeit und sehr hoher Genauigkeit (>60-fach) gegenüber Taq DNA Polymerase. AQ97 ist ideal für schwierige Targets mit sehr niedrigem oder hohem GC-Gehalt geeignet. Neben diesen Eigenschaften zeichnet sich die AQ97 auch durch Ihre Eignung, lange Targets bis zu 18 kb, zu amplifizieren aus. Dies führt zu sehr genauen und zuverlässigen PCR-Ergebnissen. AQ97 High Fidelity DNA Polymerase besitzt sowohl eine 5'→3' DNA Polymerase-Aktivität als auch eine 3'→5' proofreading Exonuklease-Aktivität, die es dieser Polymerase ermöglicht, Basenpaar-Fehlpaarungen zu korrigieren.
AQ97 High Fidelity DNA Polymerase ist ein fusionierter Proteinkomplex aus DNA-Polymerase mit einer prozessivitätssteigernden DNA-Bindungsdomäne. Neben einer sehr schnellen und robusten Amplifikation komplexer und langer Zielmoleküle zeichnet sich die AQ97 High Fidelity DNA Polymerase durch eine hohe Genauigkeit aus, was dazu führt, dass auch für lange Amplicons eine genaue Amplifikation gewährleistet ist. Dadurch eignet sich die AQ97 besonders für PCR-Experimente, die eine Amplifikation mit sehr niedrigen Fehlerraten erfordern, wie z. B. Klonen/Subklonen, NGS-Anwendungen, SNP-Analysen und Mutagenese.
Eigenschaften:
• High Fidelity: >60x Taq fidelity
• High elongation rate: 10 sec/kb (bis 6000bp per minute)
• Built in hot start technology
• Long range amplification: 18 kb for human gDNA
• 5'-3' polymerase acitivity and 3'-5' exonuclease activity.
• generates blund ends.
Bild 1: Die Vergleichswerte der Genauigkeitswerte für die AQ97-DNA-Polymerase, die AccuPol-DNA-Polymerase, die beiden Wettbewerber High-Fidelity-DNA-Polymerasen "P" und "Q" und die Taq-DNA-Polymerase wurden durch eine NGS-basierte Analyse des Nukleotid-Fehleinbaus während der PCR ermittelt. Die PCR-Amplifikation wurde mit einem synthetischen DNA-Target von etwa 200 bp durchgeführt, wobei für jede der getesteten Polymerasen PCR-Produkte erzeugt wurden (unter Verwendung der empfohlenen Setup-Bedingungen).
Bild 2: Acht verschiedene humane genomische DNA-Targets mit einer Länge von 400 bis 800 bp und einem GC-Gehalt zwischen 29% und 78% wurden mit dem AQ97 Hot Start High Fidelity DNA Polymerase 2x Master Mix amplifiziert. Für alle Targets wurde eine robuste Amplifikation beobachtet. Für Targets mit einem GC-Gehalt von mehr als 70% wurde der Reaktionsmischung 2 M Betain Enhancer Solution zugesetzt. Marker: M.
Bild 3: Es wurden fünf verschiedene Targets aus menschlicher genomischer DNA mit einer Länge von 2 kb bis 17,5 kb amplifiziert. Für alle Targets wurde eine robuste Amplifikation mit dem AQ97 Hot Start High Fidelity DNA Polymerase 2x Master Mix beobachtet, was die Fähigkeit des Master Mixes zur Amplifikation großer und komplexer Targets belegt. Die Amplikongrößen sind am oberen Rand des Gels angegeben. Marker M: High Range DNA-Leiter.
Specifications:
• High Fidelity: >60x Taq DNA Polymerase
• High elongation rate: 10 sec/kb
• 3’ → 5’ proofreading exonuclease activity
• Hot start technology
• Good coverage on difficult DNA templates with low to high GC content
• Long range capability: 18 kb for gDNA
• delivered as 2 units/µL enyzme solution
Sicherheits Hinweise / Safety
Klassifizierungen / Classification
eclass-Nr: 32-16-05-02
Dokumente:
KategorienlisteQuelle: NCBI PubMed
