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RT-qPCR enzymes and kits
Die reverse Transkriptase-PCR (RT-PCR / RNA PCR) gilt immer noch als das spezifischste und empfindlichste Verfahren zum Nachweis und zur Quantifizierung von mRNA. Unser Challenger Hotstart RT-qPCR 4x Mastermix (M3060)ist ein wesentlicher Fortschritt für die RT-PCR, da selbst stabile RNA Tertiärstrukturen durch hohe Annealingtemperaturen kein Problem mehr darstellen.
Im Laufe der letzten Jahre hat die Entwicklung von neuartigen Chemikalien und Instrumenten für die realtime PCR / qPCR dazu geführt, dass sich die realtime RT-PCR (RT-qPCR) als Methode der Wahl zur Quantifizierung von Veränderungen in der Genexpression durchgesetzt hat. Auch ist die realtime RT-PCR die bevorzugte Methode für die Validierung der Ergebnisse aus Feldanalysen und anderen Techniken, um Änderungen in der Genexpression zu verfolgen.
Im Vergleich zu anderen herkömmlichen Techniken zur Quantifizierung von mRNA - Northern Blot-Analysen und RNase-Protection-Assays - reichen bei der RT-PCR sehr viel geringere Mengen an Probe aus. Dieses Verfahren ist sogar empfindlich genug, um die Quantifizierung von RNA aus einer einzigen Zelle zu ermöglichen.
Ein Enzym zur Synthese von cDNA ist die Moloney Murine Leukemia Virus (M-MuLV, MMLV) Reverse Transkriptase >. M-MuLV Reverse Transkriptase besitzt keine 3´ → 5´ Exonukleaseaktivität.