One-Step RT-qPCR 2X Mastermix - Probe

Der One-Step RT-qPCR 2X Mastermix - Probe ohne ROX® von Genaxxon wurde für quantitative real-time-Analysen von RNA-Templates mit doppelt markierten Fluoreszenz-Probes entwickelt. Der gebrauchsfertige Mix basiert auf einer gentechnisch veränderten reversen Transkriptase mit verbesserter thermischer Stabilität, die eine erhöhte Spezifität, eine hohe cDNA-Ausbeute und eine verbesserte Effizienz für hochstrukturierte und lange cDNA-Fragmente bietet.

Um eine schnelle und einfache Handhabung mit einem Minimum an Pipettierschritten zu gewährleisten, enthält der 2X Mastermix bereits alle für die RT-qPCR erforderlichen Reagenzien (außer Template, Primer und Sonden). Die hochwertigen Enzyme und der optimierte Reaktionspuffer mit hochreinen dNTPs gewährleisten überlegene real-time PCR-Ergebnisse. Der optimierte Puffer sorgt für eine schnelle Kinetik, eine RNA-Sensitivität von <10 fg und eine zuverlässige Zielamplifikation – selbst für schwierige Templates und Multiplex-Anwendungen mit mehr als 6 Targets.

Dieser Mastermix enthält kein ROX - bitte achten Sie auf die korrekten Einstellungen Ihres qPCR-Cyclers. Eine Liste der gängigsten Thermocyclern und ihrer ROX-Kompatibilität finden Sie im Reiter "Tipps".

Allgemeine Beschreibung:
RT-qPCR wird verwendet, um doppelsträngige DNA aus einzelsträngigen RNA-Templates zu amplifizieren, bzw. um eine schnelle real-time-Quantifizierung von RNA-Targets zu ermöglichen. Im reversen Transkriptionsschritt synthetisiert die reverse Transkriptase einzelsträngige DNA-Moleküle (cDNA), die zur RNA-Matrize komplementär sind. Die so synthetisierten cDNA-Moleküle werden von einer HotStart-DNA-Polymerase in der nachfolgenden PCR amplifiziert und detektiert. Die HotStart-Polymeraseaktivität wird bei Umgebungstemperatur blockiert und zu Beginn der anfänglichen Denaturierung automatisch aktiviert. Die thermische Aktivierung verhindert die Extension von nicht spezifisch annealten Primern und Primer-Dimer-Formationen bei niedrigen Temperaturen während des PCR-Setups. Somit bietet die One-Step RT-qPCR enormen Komfort bei der Analyse von Targets aus mehreren RNA-Proben und minimiert das Risiko von Kontaminationen.

Für RNA, die einen hohen Grad an Sekundärstrukturen zeigt, bzw. für komplementäre Primer eignet sich besonders der HotScriptase Master Mix (M3064), mit dem direkt - ohne den zeitaufwendigen isothermalen Transkriptionsschritt - doppelsträngige DNA synthetisiert werden kann. Zeitersparnis: bis zu 50%.

Mit unseren hochwertigen dNTPs als Set (M3015) oder als Mix (M3016) oder unseren DNA-Markern und unserer günstigen Standardagarose bieten wir Ihnen weitere Produkte für die PCR.