Scriptase RT - cDNA Synthesekit

Genaxxon bioscience

Vorteile im Überblick

Komplett-Kit inkl. Primer und DNase: Alles, was Sie für eine erfolgreiche Reverse Transkription benötigen.
Für Templates bis 17 kb: Ideal für große RNA-Vorlagen.
Hohe Ausbeute: Reduzierte RNase-H Aktivität sorgt für optimale Ergebnisse.
Schnelle Durchführung: Vollständige Reverse Transkription in unter 10 Minuten.
Flexible Primeroptionen: Verwenden Sie spezifische Primer, Random Hexamere oder Oligo(dT) Primer

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Produktnummer: SM3134.0100
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Produktinformationen "Scriptase RT - cDNA Synthesekit"

Die Genaxxon bioscience Scriptase RT ist eine proprietäre Reverse Transkriptase mit verminderter RNase-H Aktivität und erhöhter Thermostabillität die eine hohe Spezifität, längere cDNAs und auch bei GC-reichen Ziel-RNAs eine höhere Ausbeute garantiert. Mit Hilfe der mitgelieferten Oligo(dT) und Random Hexamer Primer können Sie das Protokoll sehr einfach entsprechend Ihren Erfordernissen optimieren.

Wir empfehlen die Scriptase RT für die Synthese von cDNA von 100 bp bis zu 10 kb Länge.

Eigenschaften

Ready-to-use Kit inkl. Primer und DNase
Geeignet für Templates bis 17 kb
Hohe Ausbeute durch reduzierte RNase-H Aktivität
Komplette Reverse Transkription in unter 15 Minuten
Für spezifische Primer, Random Hexamere oder Oligo(dT) Primer
Für komplexe Transkripte RT bis 65°C möglich

Vorteile

Hohe Sensitivität
cDNA in <15 Minuten
Primer inklusive
gDNA Removal
Temperaturstabilität

Anwendungen

cDNA-Synthese
Schnelle und einfache cDNA-Synthese mit nur einem Kit. Der Scriptase RT-Kit bietet eine hohe Sensitivität und Spezifität. Zudem ist es sehr flexibel und liefert sowohl mit Oligo(dT) als auch Random Hexameren oder genspezifischen Primern hohe Ausbeuten.
Genexpressionsanalyse
Genexpressionslevels in Geweben oder unterschiedlichen Zelltypen lassen sich über die Detektion von spezifischer mRNA bestimmen. Dazu wird die Gesamt-RNA zuerst in cDNA umgeschrieben. In der nachfolgenden qPCR mit genspezifischen Primern bestimmt man das jeweilige Expressionslevel.
cDNA Sequencing (Diagnostik)
Im Rahmen der Diagnostik von RNA-Viren wird eine Reverse Transcription der Sequenzierung vorgeschaltet, um eine cDNA Library zu erstellen. Neben der Pathogendetektion selbst lassen sich damit auch Mutationsprofile von Pathogenen erstellen.
RNA-seq
Als Teil eines RNA-seq Workflows kann die mRNA-Anreicherung mittels Reverser Transkription in Verbindung mit Oligo(dT) Primern durchgeführt werden. Dadurch können sowohl mRNA Selektion und RT in einem Schritt durchgeführt werden, was insbesondere bei geringen RNA Mengen sinnvoll ist. Zu beachten ist, dass hierbei ein 3′-Bias bei der späteren Sequenzierung auftreten kann. Die Folge wäre eine erhöhte Anzahl an Reads für das 3′ Ende der RNAs.

FAQs

Für die meisten Anwendungen empfehlen wir entweder eine Kombination aus Random Hexamer und OligoDT(20) Primern im Verhältnis 1:1 oder nur Random Hexamer Primer.

Nein, das ist nicht notwendig. Der enthaltene RNase-Inhibitor im Kit verhindert den Abbau der RNA, sodass Sie nicht auf Eis pipettieren müssen.

Das Scriptase RT-cDNA Synthesekit ermöglicht die Synthese von cDNA selbst aus Proben mit sehr geringen RNA-Mengen (1pg - 5µg).

Die Entfernung genomischer DNA wird empfohlen, da selbst Primer, die nicht auf genomische DNA binden, in der qPCR ein Signal erzeugen können. Das Scriptase RT-cDNA Synthesekit enthält daher einen DNase-Enzym-Mix zur Entfernung von genomischer DNA.

Comes with:

Scriptase RT: 200 units/µL in storage buffer containing 50% glycerol (v/v).
5X RT Reaction Buffer: 250mM Tris/HCl (pH8.3), 375mM KCl, 15mM MgCl2, 50mM DTT
dNTP-Mix 10 mM each dNTP (dATP, dCTP, dGTP, dTTP)
Oligo-(dT)20 primer 100µM
Random Hexamers 100µM
RNase Inhibitor 40 units/μL. RNase inhibitor in storage buffer with 50% glycerol (v/v)
10X DNase buffer 40 units/µL.
DNase enzyme mix 5 units/µL
RNase-free water

Applikation / Application:

cDNA synthesis

Einheiten / Units:

Quelle / Source:

Sicherheits Hinweise / Safety

Klassifizierungen / Classification

eclass-Nr: 32-16-05-02

Dokumente - Protokolle - Downloads :

Hier finden Sie Informationen und weiterführende Literatur. Für weitere Dokumente (Zertifikate mit weiteren Lotnummern, Sicherheitsdatenblätter in anderer Sprache, weitere Produktinformationen) wenden Sie sich bitte an Genaxxon biosience unter: info@genaxxon.com oder Tel.: +49 731 3608 123.

Dokumente:

Sicherheitsdatenblätter
Produktbeschreibung