DNase I (EC 3.1.21.1)

DNase I ist eine Endonuklease aus Rinderpankreas, die Doppel- und Einzelstrand-DNA in Oligo- und Mononukleotiden hydrolisiert. Diese DNAse ist nicht RNase frei! DNAse I wird dazu verwendet, vor wichtigen Experimenten (wie RT-PCR) DNA aus RNA-Präparationen zu entfernen. Da keine Reinigungsmethode für RNA zu 100% die DNA entfernt, ist es angeraten, vor jeder RT-PCR die DNA mittels DNAse I zu entfernen. Ein einfacher 15-minütiger Verdau bei Raumtemperatur beseitigt zuverlässig alle kontaminierende DNA. DNase I wird inaktiviert, indem man die Stopplösung zugibt und erhitzt. Da Hitze auch die RNA denaturiert, kann der Ansatz dann sofort für die reverse Transkription benutzt werden. Diese DNAse I ist für Nick Translationen, Produktion von random Fragmenten, schneiden genomischer DNA für Footprinting und die Entfernung von DNA Templates nach in-vitro Transkriptionen benutzbar.