Proteinase K NGS Grade - Pulver

Proteinase K NGS Grade - Pulver


Artikel-Nr.: M3115.0100

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CAS-Nr: 39450-01-6

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Proteinase K NGS Grade wurde für hochanspruchsvolle Anwendungen entwickelt. Mit einer speziell... mehr
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Proteinase K NGS Grade wurde für hochanspruchsvolle Anwendungen entwickelt. Mit einer speziell entwickelten Reinigungstechnologie wird eine signifikant erhöhte Löslichkeit (2,5-fach gegenüber unserer Standard-Proteinase K) erreicht, eine erhöhte spezifische Aktivität und eine außergewöhnliche Reinheit bei einem DNA-Gehalt von ≤ 0,1pg/mg. Proteinase K NGS Grade ist frei von Exonucleasen, Endonucleasen und Ribonucleasen.

Proteinase K aus Album Parengyodontium (Tritirachium album) ist eine mit Subtilisin verwandte Serinprotease. Es handelt sich um eine Breitband-Endopeptidase mit sehr hoher spezifischer Aktivität. Proteinase K wird hauptsächlich in der Nukleinsäurereinigung oder zur Entfernung von Nukleasen eingesetzt, ohne die Integrität isolierter DNA oder RNA zu beeinträchtigen. Proteinase K wird für die Aufspaltung von Proteinen in Nukleinsäurepräparaten verwendet, da Proteinase K ein sehr breites und unspezifisches Erkennungsspektrum (schneidet die Carboxylenden von aromatischen, hydrophilen und aliphatischen Aminosäuren) besitzt und somit zuverlässig die verschiedensten Proteine verdauen kann. Damit ist das Enzym ein hervorragendes Werkzeug zur vollständigen hydrolytischen Spaltung von Proteinen (Ebeling W. et al. (1974) Eur. J. Biochem., 47, 91).

Proteinase K ist unter einer breiten Palette an Reaktionsbedingungen aktiv, einschließlich erhöhter Temperaturen und Anwesenheit von SDS. Dieses rekombinante Enzym wird in Pichia pastoris exprimiert und wird umfassend gereinigt, um ein Produkt höchster Qualität zu erhalten. Ein zusätzlicher Reinigungsschritt führt zu einer signifikant erhöhten Löslichkeit (2,5-fach), einer erhöhten spezifischen Aktivität und einem verringerten DNA-Gehalt im Vergleich zu unserem Produkt für die Molekularbiologie (Proteinase K Molbio Grade, M3036 >).

Anwendungsbeispiele:

  • Extraktion von DNA und RNA aus verschiedenen Ausgangsmaterialien
  • Präparation chromosomaler DNA für die PFGE
  • Abbau von Nukleasen (DNase, RNase) bei der Präparation von Nukleinsäuren, einschließlich der Gewinnung nativer RNA
  • Isolierung genomischer DNA aus Gewebe von Mausschwänzen
  • Isolierung genomischer DNA aus Zellkulturen

Eigenschaften:

  • Rekombinante unspezifische Breitspektrumprotease, abgeleitet von Tritirachium album und in Pichia pastoris überexprimiert
  • Hohe Aktivität und außergewöhnliche Reinheit (Molecular Biology Grade & NGS Grade).
  • Aktiv bei hohen Temperaturen (bis zu 56 ° C) und Denaturierungsbedingungen (z. B. in Gegenwart von Harnstoff und / oder SDS).
  • Stabil über einen weiten pH-Bereich: 4,0–12,5 (optimaler pH 7,5–8,0).
  • Geringer DNA-Gehalt (≤10pg/mg / MBG oder ≤0,1pg/mg NGS).

Aktivität: > 45 U/mg Protein. Fremdaktivität: RNase und DNase nicht nachweisbar. Temperatur-Optimum: +65°C (Die Aktivität ist bei +65°C ca. 12x höher als bei +25°C). Über +65°C erfolgt Inaktivierung durch Denaturierung. Stabil von pH4,0-12,5. Aktivatoren: Denaturierende Agenzien wie SDS und Harnstoff. Inhibitoren: Hg2+, DFP, PMSF (M3194) >, AEBSF (M6360) > und Phenol. Keine Inhibition durch EDTA, Sulfhydryl-Reagenzien und Trypsin- bzw. Chymotrypsininhibitoren. Stabilisatoren wie Ca2+ (1-5mM) verhindern die Autolyse.

Anwendungshinweise: Reaktionspuffer: 50mM Tris-HCl, pH7,5, 5mM CaCl2, 0,5% SDS. Übliche Stammlösung: 20mg/mL in Wasser. Lagertemperatur der Stammlösung: -20°C. Übliche Arbeitskonzentration: 50µg/mL.

Proteinase K erhalten Sie von Genaxxon als Pulver (M3036) > oder als Lösung (20mg/mL, M3037) >.

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Specifications: Appearance: white lyophilisate Activity: > 45 U/mg Protein DNA content:... mehr
 

Technische Daten:

Specifications:
Appearance: white lyophilisate
Activity: > 45 U/mg Protein
DNA content: ≤0,1pg/mg Proteinase K NGS
DNAses and RNAses: not detectable
Solubility: easily soluble in water

Applikation:

Protein digest in DNA samples Isolation of genomic DNA from mouse tails Isolation of genomic DNA from cell cultures

Einheitendefinition:

Activity: >45 U/mg protein. One unit of Proteinase K hydrolyzes urea-denaturated hemoglobin producing color equivalent of 1 μmol tyrosine per 1 min at 37°C and pH 7.5 (Folin & Ciocalteu’s method), 1 U = 1 mAnsonU.

Quelle

Tritirachium album

Sicherheits Hinweise / Safety

H-Sätze: H315, H319 ,H334, H335
GHS-Symbole: GHS07, GHS08
R-Sätze: R36/37/38-42
Gefahrstoffkürzel: Xn

Klassifizierungen / Classification

EC-Nr: 254-457-8
CAS-Nr: 39450-01-6
eclass-Nr: 32-16-04-10
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Referenzen..

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Quelle/Source: NCBI PubMed >

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