ExactRun proofreading Polymerase



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Produktinformationen "ExactRun proofreading Polymerase"

Die High Fidelity proofreading DNA Polymerase ExactRun für schwierige Templates bietet überragende Eigenschaften für alle PCR-Applikationen, selbst großer Fragmente. ExactRun besitzt eine extrem hohe Amplifikationsrate (>6000bp pro Minute), eine sehr hohe Genauigkeit und ist so robust, dass auch schwierige Templates amplifiziert werden können. ExactRun High Fidelity proofreading DNA Polymerase ist die Wahl für Klonierungen, lange (bis zu 20 kb für Plasmid DNA und bis zu 7 kb genomische DNA) oder schwierige Amplicons.

Mit einer Fehlerrate, die ca. 50-fach kleiner ist als die der Taq Polymerase bzw. selbst 6-fach kleiner als die von Pfu oder Pwo, ist die ExactRun eine der genauesten thermostabilen Polymerasen auf dem Markt. Die Genaxxon bioscience ExactRun High Fidelity proofreading DNA Polymerase besitzt 5´-3´ Polymerase Aktivität sowie 3´-5´ Exonuklease Aktivität und generiert Blunt end Produkte. ExactRun High Fidelity proofreading Polymerase für schwierige Templates wird mit Puffer und MgCl2 geliefert.

Einmaliger Testmustersonderpreis. 50% Rabatt auf den Listpreis der kleinsten Verpackungseinheit! Keine Versandkosten bei Versand innerhalb Deutschlands!

Besonderheiten:

  • High Fidelity proofreading Polymerase
  • extrem hohe Amplifikationsrate (>6000bp pro Minute)
  • Fehlerrate 6-fach kleiner als die von Pfu oder Pwo, ca. 50-fach kleiner ist als die der Taq-Polymerase
  • für lange PCR-Fragmente (bis zu 20 kb für Plasmid DNA und bis zu 7 kb genomische DNA)
  • 5´-3´ Polymerase Aktivität und 3´-5´ Exonuklease Aktivität
  • sehr schnell und robust für schwierige Templates
  • generiert blunt ends

Weitere High-Fidelity Proofreading Polymerasen von Genaxxon bioscience:
- M3002 Pwo Proofreading Polymerase >
- M3003 ReproFast Proofreading Polymerase >
- M3004 Pfunds Proofreading Polymerase >
- M3012 ReproHot (KOD) Proofreading Polymerase >
- M3030 ExactRun (Phusion like) Proofreading Polymerase >

Mit unseren hochwertigen dNTPs als Set (M3015.4100 und M3015.0250) > oder als Mix (M3016.1010) > oder unseren DNA-Markern > und unserer günstigen Standardagarose > bieten wir Ihnen weitere Produkte für die PCR.

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Unser Kommentar zu "ExactRun proofreading Polymerase"
- ExactRun is one of the most accurate thermostable polymerase available. - ExactRun DNA Polymerase possesses 5'-3' polymerase activity, 3'-5' exonuclease activity - ExactRun will generate blunt-ended products. - ExactRun DNA Polymerase is supplied with buffer and separate MgCl2.
Specifications: 2 units/µL 3´-5´ Exonuklease activity (proof-reading activity) mehr
 

Technische Daten:

Specifications:
2 units/µL
3´-5´ Exonuklease activity (proof-reading activity)

Applikation:

Proof-reading DNA polymerase for high fidelity and fast PCR.

Einheitendefinition:

One unit is defined as the amount of enzyme which will convert 10 nmoles of dNTPs to an acid-insoluble form in 30 min at 72°C under the assay conditions (25mM TAPS (tris-(hydroxymethyl)-methyl-amino-propanesulfonic acid, sodium salt) pH 9.3 (25°C); 50mM KCl; 2 mM MgCl2; 1mM b-mercaptoethanol; and activated calf thymus DNA as substrate.

Quelle

E.coli

Sicherheits Hinweise / Safety

Klassifizierungen / Classification

eclass-Nr: 34-16-04-90
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Hier finden Sie Informationen und weiterführende Literatur zu ExactRun proofreading Polymerase. Für weitere Dokumente (Zertifikate mit weiteren Lotnummern, Sicherheitsdatenblätter in anderer Sprache, weitere Produktinformationen) wenden Sie sich bitte an Genaxxon biosience unter: info@genaxxon.com oder Tel.: +49 731 3608 123.

 
 
 
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Die Reaktionsbedingungen können sich von denen in bereits verwendeten PCR-Protokollen unterscheiden, da die ExactRun-DNA-Polymerase tendenziell höhere Denaturierungs- und Annealingtemperaturen benötigt. Insbesondere die Annealingtemperatur kann sich signifikant von der der Taq-DNA-Polymerase unterscheiden.

- Die Menge an Enzym hängt von der Menge der Matrize und der Länge des Amplikons ab. Normalerweise reicht 1 Unit ExactRun pro 50 μl Reaktionsvolumen für gute Ergebnisse, aber die optimale Menge kann von 0,25 bis 2 Units pro 50 μl Reaktion variieren.
Es wird dringend empfohlen, 2 Units / 50μL nicht zu überschreiten!

- Beim Klonieren von Fragmenten, die mit der ExactRun DNA-Polymerase amplifiziert wurden, ist das Klonen von blunt ends möglich. Wenn eine TA-Klonierung erforderlich ist, siehe Seite 5 im Manual (Verwendung eines PCR-Produkts zur T / A-Klonierung).

- Die Konzentration von Mg2+ ist kritisch für die PCR. Überschüssiges Mg2+ stabilisiert den DNA-Doppelstrang. Überschüssiges Mg²+ kann aber auch das falsche Anlagern von Primern an inkorrekte Matrizenstellen stabilisieren und die Spezifität verringern. Unzureichendes Mg2+ kann zu einer geringeren Produktausbeute führen. Die optimale Mg2+ -Konzentration hängt von der dNTP-Konzentration, der spezifischen Template-DNA und dem Probenpuffer ab. In der Regel liegt die optimale Mg2+ -Konzentration ca. 1 mM über der Gesamt-dNTP-Konzentration für Standard-PCR. Wenn eine Komponente der PCR-Reaktion EDTA oder EGTA enthält, kann das scheinbare Mg2+ -Optimum zu höheren Konzentrationen hin verschoben sein.

- PCR-Additive / DMSO: Einige Publikationen empfehlen die Zugabe von 3% DMSO für GC-reiche Template, um die Denaturierung der DNA zu unterstützen. In einigen Fällen kann DMSO auch für Supercoil-Plasmide erforderlich sein. Andere Additive wie Formamid, Glycerin und Betain können auch zusammen mit ExactRun verwendet werden.
Bei hohen DMSO-Konzentrationen muss die Annealingperatur zwischen 3° C und 6° C reduziert werden.

- Primer-Annealing: Für Primer > 20 nt sollte eine Annealingtemperatur von 5° C über der unteren Primer-Tm verwendet werden.
Für Primer < 20 nt verwenden Sie eine Annealingtemperatur von 7° C über der unteren Primer-Tm.
Annealingsdauer: 10 - 30 Sekunden.
Ein 2-Schritt-PCR-Protokoll wird empfohlen, wenn die Primer-Tm-Werte mindestens 69 ° C betragen.
Die Extensionsdauer hängt von der Länge und Komplexität der Matrize ab. Wir empfehlen eine Extensionsrate von 15 s / kb für niedrigkomplexe DNA (Plasmide, Lambda-DNA oder BAC-DNA) und eine Extensionsrate von 30 s / kb für hochkomplexe DNA (genomisch). Manchmal müssen die Extensionsraten auf 40 s / kb reduziert werden.

 
 
 
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Referenzen..

Hier finden Sie Artikel und Literaturzitate, in denen die Autoren auf die hohe Qualität dieses Genaxxonprodukts vertrauen.
Listed below are articles and references, in which the authors trust in the high quality of this Genaxxon product.

Quelle/Source: NCBI PubMed >

Structural Basis of the Interaction of MbtH-like Proteins, Putative Regulators of Nonribosomal Peptide Biosynthesis, with Adenylating Enzymes

Dominik A. Herbst, Björn Boll, Georg Zocher, Thilo Stehle, Lutz Heide

J Biol Chem. 2013 Jan 18; 288(3): 1991–2003. Published online 2012 Nov 28. doi: 10.1074/jbc.M112.420182

PMCID: PMC3548506

 
 
 
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