tRNA aus Hefe

Co-Präzipitationsmittel zur quantitativen Fällung von DNA. Nanogramm-Mengen an DNA können mit Hilfe von 'Carrier'-Nukleinsäuren sehr effizient gefällt werden. Dazu gibt man 10µg/mL tRNA (aus Hefe, E. coli oder aus Rinderleber) zu der entsprechenden DNA-Probe. Die DNA wird dann mit der tRNA kopräzipitiert. Die 'Carrier'-tRNA stört die meisten Enzymreaktionen nicht, wird allerdings sehr effektiv durch die Polynukleotidkinase phosphoryliert und sollte daher nicht verwendet werden, wenn die DNA nach der Fällung mit diesem Enzym behandelt werden soll (z. B. Radiomarkierungen). Als Stammlösung kann die tRNA mit einer Konzentration von 10 - 20 mg/mL in DEPC-Wasser (z.B. M6082) gelöst und dann wiederholt mit gepuffertem Phenol extrahiert werden. Die gereinigte tRNA wird dann auf eine Konzentration von 4 oder 10 mg/mL verdünnt und bei -20°C gelagert.