Viral RNA Purification Kit

Viral RNA Purification Kit


Artikel-Nr.: S5301.0250

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Dieser RNA und DNA-Kit wurde für die schnelle und effektive Isolierung von RNA und DNA aus einer... mehr
Produktinformationen "Viral RNA Purification Kit"

Dieser RNA und DNA-Kit wurde für die schnelle und effektive Isolierung von RNA und DNA aus einer Vielzahl von Krankheitserregern wie Viren oder Bakterien entwickelt. Proben können frisches oder gefrorenes Plasma/Blut (behandelt mit Antikoagulanzien EDTA, Citrat oder ACD), Serum, andere zellfreie Körperflüssigkeiten oder mit Krankheitserregern infiziertes Gewebe sein. Der Kit wurde speziell entwickelt, um hochwertige Nukleinsäuren mit geringen Elutionsvolumina zu isolieren und eine nachgeschaltete Analyse wie quantitative PCR und RT-PCR zu ermöglichen. Die gereinigte RNA/DNA ist frei von Proteinen und Nukleasen. Unser Viral RNA und DNA-Reinigungskit verwendet einen Lysepuffer mit chaotropen Salzen zur Inaktivierung von RNasen/DNasen und eine fortschrittliche Kieselgelmembrantechnologie zur schnellen Reinigung intakter RNA/DNA.

Mit diesem Kit erhalten Sie die gereinigte RNA innerhalb von 30 Minuten.

RNA aus Plasma, Serum, Urin, Zellkulturüberstand, zellfreier Flüssigkeit oder virusinfiziertem Gewebe
Transferiere 150µL Plasma, Serum, Urin, Zellkulturüberstand, zellfreie Lösungen oder vireninfiziertes Gewebe in ein 1,5mL Reaktionsgefäß.
Achtung: Probenvolumina kleiner 150µL müssen mit PBS Buffer auf150µL aufgefüllt werden. Proben mit einem größeren Volumen (bis 300µL) können einfach entsprechend angepasst werden. Eventuell ist dann zu berücksichtigen, dass größere Reaktionsgefäße für die Lyse benötigt werden.
Gib 300µL (2 -fache Menge der Probenmenge) Lysepuffer hinzu.
Vortexe für 15 Sekunden
Inkubiere bei Raumtemperatur (20°C - 25°C) für 10 Minuten
Gib 300µL (2 -fache Menge der Probenmenge) Bindepuffer hinzu und vermische gut durch leichtes Vortexen.

RNA aus Nasen- oder Halsabstrichen
Transferiere 150µL PBS-Puffer in ein 1,5mL Reaktionsgefäß.
Gib 300µL Lysepuffer hinzu.
Schneide die Baumwollspitze des Nasen- oder Halsabtrichbestecks ab und platziere es in das vorbereitete Reaktionsgefäß.
Schließe das Reaktionsgefäß und vortexe für 15 Sekunden
Inkubiere bei Raumtemperatur (20°C - 25°C) für 10 Minuten
Gib 300µL Bindepuffer hinzu und vermische gut durch leichtes Vortexen.

Reinigungprotokoll
Laden der Reinigungssäulchen

Platziere eine Spin Column in ein 2mL Auffanggefäß.
Pipettiere den Lyseansatz in das Reinigungssäulchen und zentrifugiere bei 13,000 g für 1 Minute.
Achtung: Die maximale Beladung des Reinigungssäulchens beträgt 800μL. Für größere Volumina wird der Durchfluss verworfen und das Reinigungssäulchen ein weiteres Mal mit Lyseansatz beladen und zentrifugiert.
Der Durchfluß wird verworfen und das Reinigungssäulchen wieder in dasselbe 2mL Auffanggefäß gesteckt.

Waschen der gebundenen RNA
Gib 500µL Waschpuffer A in das Reinigungssäulchen und zentrifugiere bei 13,000 g für 1 Minute.
Verwerfe den Durchfluß und stecke anschließend das Reinigungssäulchen wieder in daselbe 2mL Auffanggefäß.
Gib 500µL Waschpuffer B in das Reinigungssäulchen und zentrifugiere bei 13,000 g für 1 Minute.
Achtung: Bevor der Waschpuffer B das erste Mal benutzt wird, muss Ethanol zum Waschpuffer gegeben werden (siehe Flaschenetikett oder Manual).
Verwerfe den Durchfluss und stecke anschließend das Reinigungssäulchen wieder in dasselbe 2mL Auffanggefäß.
Zentrifugiere bei 13,000 g für 1 Minute.
Achtung: Es ist äußerst wichtig die Membran des Reinigungssäulchens komplett zu trocknen, da eventuell vorhandenes Ethanol nachfolgende Schritte stören/inhibieren kann.

Elution
Stecke das trockene Reinigungssäulchen in ein frisches 1,5mL Auffanggefäß (nicht Besandteil dieses Kits).
Gebe 30-60µL Elutionspuffer direkt auf die Membran im Reinigungssäulchen.
Achtung: Dabei darf auf keinen Fall die Membran des Reinigungssäulchens mit der Pipettenspitze berührt werden!
Inkubiere bei Raumtemperatur für 1 Minute.
Zentrifugiere bei 13,000 g für 1 Minute.
Die eluierte RNA und/oder DNA kann sofort für nachfolgende Analysen benutzt oder für spätere Anwendungen bei -80°C gelagert werden.
Nimm 2-5µL als RNA oder DNA-Template für eine PCR- oder RT-PCR Reaktion.

Bsp.: von nachgeschalteten Anwendungen: RT-PCR, RT-qPCR, Northern blotting, cDNA synthesis, primer extension, RT-PCR, RNA sequencing, micro arrays.

Weitere RNA-Reinigungskits und Zubehör von Genaxxon: DNA and RNA Purification Kit >, 96-well Plate Total RNA Purification Kit > und miRNA Purification Kit > sowie Total RNA Purification Mini Spin Kit > ohne keramische Beads.

Unsere RNA- > und DNA-Reinigungssäulchen > zur Isolation von Gesamt-RNA oder DNA aus enzymatischen Reaktionen oder keramische Beads > zur schnellen Zerkleinerung der Zellen können Sie separat nachbestellen.

Mit unereren HotScriptase RT Polymerase > Kits können Sie RNA schnell und einfach mittels PCR direkt in DNA umschreiben und amplifizieren. Sie benötigen hierzu keine reverse Transkriptase und auch keinen reversen Transkriptionsschritt. Unsere HotScriptase RT gibt es auch als Mastermix >, mit dem Sie direkt aus Zellen ohne vorherige Isolation die RNA zu DNA umschreiben und amplifizieren können!

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Technische Daten:

Specifications:
Purity of isolated RNA: A260/A280 = 1.9 - 2.1
Binding capacity of columns: approximately 120µg RNA
Time for purification: about 10-12 minutes

Applikation:

RNA purification for downstream applications as RT-PCR, RT-qPCR, Northern blotting, cDNA synthesis, primer extension, RT-PCR, RNA sequencing, micro arrays, etc.

Sicherheits Hinweise / Safety

H-Sätze: H225, H314, H315, H319, H335, H412
GHS-Symbole: GHS02, GHS05, GHS07,

Klassifizierungen / Classification

eclass-Nr: 32-16-04-05
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Hier finden Sie Informationen und weiterführende Literatur zu Viral RNA Purification Kit. Für weitere Dokumente (Zertifikate mit weiteren Lotnummern, Sicherheitsdatenblätter in anderer Sprache, weitere Produktinformationen) wenden Sie sich bitte an Genaxxon biosience unter: info@genaxxon.com oder Tel.: +49 731 3608 123.

 
 
 
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Referenzen..

Hier finden Sie Artikel und Literaturzitate, in denen die Autoren auf die hohe Qualität dieses Genaxxonprodukts vertrauen.
Listed below are articles and references, in which the authors trust in the high quality of this Genaxxon product.

Quelle/Source: NCBI PubMed >

The knockdown of the Mediator complex subunit MED15 restrains urothelial bladder cancer cells' malignancy

Isabella Syring, Richard Weiten, Tim Müller, Doris Schmidt, Susanne Steiner, Glen Kristiansen, Stefan C. Müller, Jörg Ellinger

Oncol Lett. 2018 Sep; 16(3): 3013–3021. Published online 2018 Jun 25. doi: 10.3892/ol.2018.9014

PMCID: PMC6096071

Comprehensive analysis of the transcriptional profile of the Mediator complex across human cancer types

Isabella Syring, Niklas Klümper, Anne Offermann, Martin Braun, Mario Deng, Diana Boehm, Angela Queisser, Anne von Mässenhausen, Johannes Brägelmann, Wenzel Vogel, Doris Schmidt, Michael Majores, Anne Schindler, Glen Kristiansen, Stefan C. Müller, Jörg Ellinger, Zaki Shaikhibrahim, Sven Perner

Oncotarget. 2016 Apr 26; 7(17): 23043–23055.  Published online 2016 Mar 30. doi: 10.18632/oncotarget.8469

PMCID: PMC5029609

 
 
 
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