Zeocin™

Artikel-Nr.: M3446.0250
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Zeocin™ (Phleomycin D1) gehört zur strukturverwandten Gruppe des Bleomycin/Phleomycintypus. Es wird als selektives Agens in Transformationsprozessen mit Säuger-, Pflanzen- und Hefezellen eingesetzt.
Der Zytotoxische Effekt resultiert aus der Fähigkeit DNA zu fragmentieren. Dabei bindet Zeocin™ mit seinem aminoterminalen Peptidende an DNA. Dieser aktivierte Komplex generiert freie Radikale die zur Spaltung von DNA-Bindungen führen.
Zeocin™ wird als selektives Agens zur Einführung des Sh ble Genes benutzt, das für ein 13.665 Dalton Protein codiert. Das Protein verhindert die schädliche Wirkung von Zeocin™, indem es an Zeocin™ bindet und somit die Aktivität von Zeocin™ unterdrückt. Zeocin™ ist ein Markenname von Cayla.
Technische Daten:
Specifications:
Appearance: blue powder
Solubility: easily soluble in water
C55H85O21N20S2Cu x HCl
MW = 1525 g/mol
Applikation:
Zeocin™ causes cell death by intercalating into DNA and cleaving it. The action of Zeocin™ is effective on most aerobic cells. Zeocin™ is used at a concentration of 50-300µg/ml for selection in mammalian cells and 25µg/ml for bacterial selection.Quelle
Streptomyces verticullusSicherheits Hinweise / Safety
H-Sätze: H302GHS-Symbole: GHS07
R-Sätze: Xn
Gefahrstoffkürzel: R22
Klassifizierungen / Classification
CAS-Nr: 11006-33-0eclass-Nr: 32-16-04-05
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Hier finden Sie Informationen und weiterführende Literatur zu Zeocin™. Für weitere Dokumente (Zertifikate mit weiteren Lotnummern, Sicherheitsdatenblätter in anderer Sprache, weitere Produktinformationen) wenden Sie sich bitte an Genaxxon biosience unter: info@genaxxon.com oder Tel.: +49 731 3608 123.
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Zeocin™ Selection in E. coli
Host: Must not contain the Tn5 transposon (i.e. TOP10, DH5, DH10).
Medium: Use Low Salt LB Medium (10g Tryptone, 5g NaCl, and 5g Yeast Extract) at pH7.5 to prevent inactivation of Zeocin™.
Selection: Use 25-50μg/mL of Zeocin™ for selection in E. coli.
Zeocin™ Selection in Yeast
Yeast: Saccharomyces cerevisiae, Pichia pastoris
Medium: YPD with 1M sorbitol (electroporated cells); YPD or minimal plates (chemically transformed cells). Test the medium adjusted to pH values ranging from 6.5-8.0 and select the pH that allows you to use lowest Zeocin™ concentration.
Transformation Method: Use electroporation, lithium cation protocols, or EasyComp™ Kits. Do not use spheroplasting for yeast transformation with Zeocin™ containing plasmids as it results in complete cell death.
Selection: Use 50-300μg/mL of Zeocin™, depending on the yeast strain, and media pH and ionic strength. Perform a kill curve to determine the lowest Zeocin concentration required to kill the untransformed host strain.
Note: Allow the cells to recover for 1 hour in YPD medium after transformation. To obtain efficient Zeocin™ selection, plate at low cell densities (use 10, 25, 50, 100, and 200 μL of transformation reaction).
Referenzen..
Hier finden Sie Artikel und Literaturzitate, in denen die Autoren auf die hohe Qualität dieses Genaxxonprodukts vertrauen.
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Mireia Casasampere, Luz Camacho, Francesca Cingolani, Josefina Casas, Meritxell Egido-Gabás, José Luís Abad, Carmen Bedia, Ruijuan Xu, Kai Wang, Daniel Canals, Yusuf A. Hannun, Cungui Mao, Gemma Fabrias
J Lipid Res. 2015 Oct; 56(10): 2019–2028. doi: 10.1194/jlr.D061564
Correction in:
J Lipid Res. 2016 Aug; 57(8): 1598.
PMCID: PMC4583077