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CRISPR/Cas9 optimierter Arbeitsablauf

Die gRNA ("guide RNA") des CRISPR/Cas9-Systems ist eine synthetische RNA, die aus einem unspezifischen Sequenzteil (tracrRNA) zur Bindung an das Cas9-Protein und einem genspezifischen Teil, der crRNA (spacer RNA, ca. 20-mer), besteht. Die crRNA-Sequenz dient der Erkennung des zu verändernden Zielgens. In einem Übersichtsschema (nach Liang et al., 2015) zeigen wir einen optimierten Arbeitsablauf für Zellanalysen mit dem CRISPR/Cas9 System von der theoretischen Planung der gRNA über Transkription und Transfektion bis hin zur Analyse der experimentell gewonnenen Daten innerhalb kürzester Zeit mit Tipps für spezielle Produkte, die Sie hierfür verwenden können.

 

CRISPR/Cas9 Anwendungen

Clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPRs) und CRISPR-associated (Cas) Systeme haben die Anwendung der Genmanipulation revolutioniert, indem sie ein einfaches und effizientes Werkzeug für die beliebige Veränderung von Genen darstellen. Dabei kann das CRISPR/Cas9-System mehrere Genloci gleichzeitig verändern, ohne dass dafür der Aufwand bzw. das Vorgehen verändert werden müsste.