GelRed® in Wasser - DNA Farbstoff



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GelRed(TM) ist ein ultrasensitiver, extrem stabiler Fluoreszenzfarbstoff zum Färben von... mehr
Produktinformationen "GelRed® in Wasser - DNA Farbstoff"

GelRed(TM) ist ein ultrasensitiver, extrem stabiler Fluoreszenzfarbstoff zum Färben von Nukleinsäuren, der das hochtoxische Ethidiumbromid (EtBr) zum Färben von dsDNA, ssDNA oder RNA in Agarose- oder Polyacrylamidgelen ersetzt. GelRed(TM) ist viel empfindlicher als EtBr, ohne dass ein Entfärbeschritt benötigt wird. GelRed(TM) ist weniger toxisch und weniger mutagen als EtBr wobei beide praktisch dasselbe UV-Spektrum zeigen, so dass man EtBr direkt ersetzen kann, ohne existierende Imagingsysteme ersetzen zu müssen. GelRed(TM) kann dazu benutzt werden, dsDNA, ssDNA oder RNA mittels pre-staining oder post-staining in Agarosegelen > zu färben. PAGE-Gele können nur mit dem post-staining Verfahren angefärbt werden. GelRed(TM) stört auch eine weitergehende Verarbeitung der DNA, wie Restriktionverdaus, Southernblots oder Klonierungen nicht.

Eine Serie von Sicherheitstests hat gezeigt, dass GelRed(TM) weit über die verwendeten Dosen hinaus nicht giftig, nicht mutagen und nicht gefährlich ist. Als ein Resultat daraus kann der Fluoreszenzfarbstoff mit dem normalen Abfall entsorgt werden und spart damit neben dem separaten Handling des EtBr-Abfalls auch noch merklich an Entsorgungskosten. Der Fluoreszenzfarbstoff GelRed(TM) wird als 10,000X Lösung in Wasser geliefert. Diese Lösung kann direkt zum post-staining eingesetzt werden. Für Kunden, die eine kostengünstige Großpackung suchen, bieten wir GelRed(TM) auch als 10mL-Lösung (10000X in Wasser) an.

Für erstklassige Agarosegele bieten wir unsere Standard Agarose LE > , oder auch unsere Spezialagarosen mit hoher Auflösung Tiny (M3046) > , Tiny LMH (M3048) > oder Tiny HT (M3047) > an.

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Unser Kommentar zu "GelRed® in Wasser - DNA Farbstoff"
Safer than EtBr: Shown by Ames test and other tests to be nonmutagenic and noncytotoxic. Easy disposal: Passed environmental safety tests for direct disposal down the drain or in regular trash. Ultra-sensitive: Much more sensitive than EtBr and ethidium bromide alternative SYBR® Safe. Extremely stable: Stable at room temperature for long-term storage. Compatible with standard UV transilluminator or visible light gel reader: GelRed™ replaces EtBr with no optical setting change; GelGreen™ replaces SYBR® dyes with no optical setting change.
10000 times solution in water. mehr
 

Technische Daten:

10000 times solution in water.

Applikation:

Flexible for different procedures: Use in either precast or post electrophoresis gel staining, compatible with common downstream applications like cloning and sequencing.

Quelle

synthetic

Sicherheits Hinweise / Safety

Klassifizierungen / Classification

eclass-Nr: 32-16-04-03
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Tipps für GelRed®- Anwendungen (Gele: 1,5% Agarose)

1. Verdünnung der GelRed®-Stammlösung, wenn GelRed® vor dem Auftragen auf das Gel direkt in das PCR-Produkt gegeben werden soll:

Ansatz einer 300-fachen GelRed® (10 000X)-Lösung:
3 μL GelRed® (10 000X) werden mit 97 μL H2O oder 6X-Loading buffer verdünnt.
Diese Mischung wird direkt zur Probe als 6X- Puffer gegeben und aufgetragen.
Alternativ wird ein 5X- Puffer hergestellt:

5X-GelRed®/Loading Buffer:
100 μL 6X-Loading Buffer
2 μL GelRed® 300X
18 μL dH2O,
als 5X-Puffer zu verwenden (4μL Sample / 1 μL Loading Buffer mit GelRed®)

Die Endkonzentration entspricht dann 1X GelRed®(Dies ergibt allerdings relativ schwache Banden.).

Als optimal hat sich bei Genaxxon eine GelRed®-/Ladepuffer-Konzentration von 20X herausgestellt:
Von der 300X- Lösung (s. oben):
100 μL 6X-Loading buffer
8 μL GelRed® 300X
12 μL dH2O,
als 5X-Puffer benutzen (Verhältnis 4μL Sample / 1 μL Loading buffer mit GelRed®, aber evtl. wegen geringem
Ladevolumen mit Wasser gemischt, so dass eine gleichmäßige Befüllung der Taschen gewährleistet ist, die tatsächliche
Menge richtet sich nach individuellem Erfahrungswert des Anwenders).

2. GelRed® im Gel (Precast):
In 100 mL TBE-/ TAE-Gel werden 10μL GelRed® empfohlen, es ist möglich, bis
auf 3,5/100 μL zu reduzieren.

3. Poststaining:

3X Färbelösung in Wasser mit 0.1M NaCl (erhöht die Sensitivität):
15μL GelRed® stock solution und 5 mL NaCl auf 45 mL Wasser;
Gel ca. 30 Min. im Färbebad lassen, normale UV- Illustrierung

Färbebad NICHT in TAE-/ TBE- Puffer machen!

4. GelRed® für Southern Blot:

Es ist möglich, den Transfer von DNA auf eine Membran mit einem GelRed®- gefärbten Agarose-Gel zu
erkennen. Dabei kommt es zu keinerlei Störungen nachfolgender Schritte.

Protokoll: Färbung des Gels in GelRed® Färbebad. Wir empfehlen, NaCl zum Färbebad hinzuzufügen.
3X Färbebad in Wasser mit 0.1M NaCl:
15μL GelRed® stock solution und 5 mL NaCl auf 45 mL Wasser; Gel ca. 30 Min. im Färbebad lassen.

Blotten nach normalem Elektroblotting-Protokoll. Kontrolle der Blotting-Membran unter UV-Licht.
Weiterführende Schritte wie üblich. Kein Entfärben notwendig.

 
 
 
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Referenzen..

Hier finden Sie Artikel und Literaturzitate, in denen die Autoren auf die hohe Qualität dieses Genaxxonprodukts vertrauen.
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Quelle/Source: NCBI PubMed >

 

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Interleukin-4 Protects Dopaminergic Neurons In vitro but Is Dispensable for MPTP-Induced Neurodegeneration In vivo

 

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Proximity ligation assay evaluates IDH1R132H presentation in gliomas
Lukas Bunse, Theresa Schumacher, Felix Sahm, Stefan Pusch, Iris Oezen, Katharina Rauschenbach, Marina Gonzalez, Gergely Solecki, Matthias Osswald, David Capper, Benedikt Wiestler, Frank Winkler, Christel Herold-Mende, Andreas von Deimling, Wolfgang Wick, Michael Platten
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Mesenchymal stem cell contact promotes CCN1 splicing and transcription in myeloma cells

 

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PMCID: PMC3495878

 

 
 
 
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