GreenMasterMix (2X) Low ROX für die qPCR
Artikel-Nr.: M3011.0100
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Green qPCR Mastermix Low ROX optimiert für die qPCR (realtime) PCR in Blocksystemen. Der Green qPCR Mastermix mit 50nM ROX enthält einen interkalierenden Fluoreszenzfarbstoff und alle notwendigen Komponenten in einer optimierten Menge, um eine quantitative PCR durchzuführen.
Vorteile der im Genaxxon ProbeMasterMix eingesetzten chemisch modifizierten SuperHot Taq-Polymerase:
- Hotstarttechnologie für das Setup bei Raumtemperatur
- Kein Pipettieren auf Eis notwendig
- Kein sofortiges Weiterbearbeiten (PCR) notwendig. Die pipettierten PCR-Ansätze können bis zu 3 Tagen bei RT stehengelassen werden.
- Amplifikation auch von GC-reichen Templates
- Hohe Ausbeute
- Keine Primerdimerbildung
Die Genaxxon SuperHot Taq DNA-Polymerase bietet Komfort und Praktikabilität für konstante Effizienz und Spezifität:
1. Sie inhibiert die Polymerase bei niedrigen Temperaturen und verhindert so zuverlässig unspezifische PCR-Reaktionen. Daher muss das PCR Setup nicht auf Eis durchgeführt werden.
2. Dies führt dazu, dass der PCR-Ansatz bei RT (20°C bis 25°C) zusammengemischt und bis zu 3 Tage gelagert werden kann, ohne das Endergebnis zu beeinflussen (z.B. während der Mittagspause oder während des Wartens auf weitere Proben).
Der Green qPCR Mastermix ohne ROX enthält alle notwendigen Komponenten in einer optimierten Menge, um eine quantitative PCR durchzuführen.
- chemisch modifizierte Taq DNA Polymerase
- dATP, dCTP, dGTP, dTTP
- 50nM ROX
- interkalierender, grüner Fluoreszenzfarbstoff
- optimierter Reaktionspuffer
- Stabilisator und Enhancer, um sogar die Amplifikation von low copy number Targets zu ermöglichen
- Die kleinen Aliquots von 1,25mL vereinfachen die Handhabung und die Lagerung (weniger Einfrier- und Auftauzyklen pro Aliquot).
Stabilität bei +2°C bis +8°C (Kühlschrank): Mindestens 8 Monate.
Speziell geeignet für: Applied Biosystems® 7500, 7500 Fast and ViiA™ 7, QuantStudio™ instruments, Agilent Mx3000P™, Mx3005P™, Mx4000™ and AriaMx.
Andere realtime PCR Mastermixe von Genaxxon sind: M3023 - GreenMastermix No ROX >, M3045 - ProbeMastermix No ROX >, M3011 - GreenMastermix Low ROX >, M3031 - ProbeMastermix Low ROX >, M3052 - GreenMastermix High ROX >, M3010 - ProbeMastermix High ROX >.
Unsere Daten zeigen, dass der Genaxxon ProbeMastermix High ROX (M3011) > sowie der analoge GreenMastermix M3023 > (= M3011 mit grünem Fluoreszenzfarbstoff) vergleichbare Ergebnisse zu entsprechenden qPCR Mastermixen von Wettbewerbern liefert.
Testmuster zum Sonderpreis erhältlich! Keine Versandkosten bei Versand innerhalb Deutschlands! Der Testmusterpreis wird bei der ersten offiziellen Bestellung des Produkts zurückerstattet.
High Sensitivity and Specifity, Optimised buffer system, Reproducibility over a wide range of template amounts, Broad dynamic range. Aliquot size: 1.25mL. This master mix is stable for at least 8 months at +2°C to +8°C.
Technische Daten:
This GreenMastermix is a ready-to-use 2X mastermix that contains 50nM ROX™ as passive Reference dye, and a green fluorescent dye.
Aliquot size: 1.25mL. This master mix is stable for at least 8 months at +2°C to +8°C.
Applikation:
PCR Primer extension Low-copy targets PCR Real-time PCR Quantitative PCREinheitendefinition:
One unit is defined as the amount of enzyme which will convert 10 nmoles of dNTPs to an acid-insoluble form in 30 min at 72°C under the assay conditions (25 mM TAPS (tris-(hydroxymethyl)-methyl-amino-propanesulfonic acid, sodium salt) pH 9.3 (25°C); 50 mM KCl; 2 mM MgCl2; 1 mM b-mercaptoethanol; and activated calf thymus DNA as substrate.Sicherheits Hinweise / Safety
Klassifizierungen / Classification
eclass-Nr: 34-16-04-90Dokumente - Protokolle - Downloads
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Fast PCR:
When performing fast real-time PCR, it is of high importance to consider primer design and target size. For efficient amplification during fast cycling conditions, target size between 70 bp and 200 bp is recommended. The shorter the target length, the faster the total run time. For other targets and other primer sets, the annealing step has to be determined experimentally.
Please use the following protocol for inspiration as you need to optimize instruments settings according to yourr target size and applied instruments.
Fast real-time PCR results using Genaxxon Master Mixes on Mx3005P
GreenMasterMix Low ROXTM and ProbeMasterMix Low ROXTM were tested on Mx3005P (Agilent Technologies) using fast cycling real-time 2-step protocols; Fast Pthr Green Mx and Fast Pthr Probe Mx, respectively.
qPCR Setup: For GreenMasterMix Low ROXTM and ProbeMasterMix Low ROXTM, primers targeting Pthr (75 bp) and 4 concentrations of gDNA (40 ng, 20 ng, 10 ng and 5 ng) were used. All DNA concentrations were tested in quadruple replicates. See fig. 3 and 4. The PCR reaction mix was run on MX3005P (Requiring Low ROX). Instrument settings, run times and quality criteria for the applied fast protocols; Fast Pthr Green Mx and Fast Pthr Probe Mx, were compared to the standard protocol; Standard Pthr Mx. See table 2.
Results: The standard Fast Pthr Probe Mx protocol has a run time of 83.4 minutes. Fast Pthr Green Mx and Fast Pthr Probe Mx protocols, resulted in run times of 50.1 and 46.8 minutes, respectively. All protocol times are inclusive ramping time and a15 minutes hot start. The determined criteria, as shown in table 2, for Fast Pthr Green Mx and Fast Pthr Probe Mx protocols were acceptable. Furthermore, the melt curve analysis using GreenMasterMix Low ROXTM with Fast Pthr Green Mx protocol, confirmed high specificity.
Figure 3. Amplification plot, standard curve and melt curve for GreenMasterMix run on Mx3005P using Fast Pthr Green Mx protocol. Primers targeting Pthr (75 bp) and 4 concentrations of gDNA (40 ng, 20 ng, 10 ng and 5 ng) were used. All DNA concentrations were tested in quadruple replicates.
Figure 4. Amplification plot and standard curve for ProbeMasterMix run on Mx3005P using Fast Pthr Probe Mx protocol. Primers targeting Pthr (75 bp) and 4 concentrations of gDNA (40 ng, 20 ng, 10 ng and 5 ng) were used.
Referenzen..
Hier finden Sie Artikel und Literaturzitate, in denen die Autoren auf die hohe Qualität dieses Genaxxonprodukts vertrauen.
Listed below are articles and references, in which the authors trust in the high quality of this Genaxxon product.
Quelle/Source: NCBI PubMed >
Keratinocyte-derived IκBζ drives psoriasis and associated systemic inflammation
Sebastian Lorscheid, Anne Müller, Jessica Löffler, Claudia Resch, Philip Bucher, Florian C. Kurschus, Ari Waisman, Knut Schäkel, Stephan Hailfinger, Klaus Schulze-Osthoff, Daniela Kramer
JCI Insight. 2019 Nov 14; 4(22): e130835. Published online 2019 Nov 14. doi: 10.1172/jci.insight.130835
PMCID: PMC6948851
Cell density‐dependent auto‐inducible promoters for expression of recombinant proteins in Pseudomonas putida Annika Meyers, Christoph Furtmann, Katrin Gesing, Iasson E. P. Tozakidis, Joachim Jose
Microb Biotechnol. 2019 Sep; 12(5): 1003–1013. Published online 2019 Jun 25. doi: 10.1111/1751-7915.13455
PMCID: PMC6680623
Long Noncoding RNA SSR42 Controls Staphylococcus aureus Alpha-Toxin Transcription in Response to Environmental Stimuli
Jessica Horn, Maximilian Klepsch, Michelle Manger, Christiane Wolz, Thomas Rudel, Martin Fraunholz
J Bacteriol. 2018 Nov 15; 200(22): e00252-18. Prepublished online 2018 Aug 27. Published online 2018 Oct 23. doi: 10.1128/JB.00252-18
PMCID: PMC6199474
MiR-744-5p inducing cell death by directly targeting HNRNPC and NFIX in ovarian cancer cells
Michael Kleemann, Helga Schneider, Kristian Unger, Philip Sander, E. Marion Schneider, Pamela Fischer-Posovszky, René Handrick, Kerstin Otte
Sci Rep. 2018; 8: 9020. Published online 2018 Jun 13. doi: 10.1038/s41598-018-27438-6
PMCID: PMC5998049
miR-217-5p induces apoptosis by directly targeting PRKCI, BAG3, ITGAV and MAPK1 in colorectal cancer cells
Marion Flum, Michael Kleemann, Helga Schneider, Benjamin Weis, Simon Fischer, René Handrick, Kerstin Otte
J Cell Commun Signal. 2018 Jun; 12(2): 451–466. Published online 2017 Sep 14. doi: 10.1007/s12079-017-0410-x
PMCID: PMC5910322
