Rekombinante Proteine

HER2/neu/ErbB-2 (human epidermal growth factor receptor 2) ist ein Membranglycoprotein der ErbB-Familie von Tyrosinkinaserezeptoren. Die Proteine dieser Gruppe (ErbB1-4) dienen als Rezeptoren der Epidermal growth Faktoren. ErbB2 wird auf der Oberfläche von Epithelzellen und stark überexprimiert auf der Membran von Krebszellen, speziell von Brustkrebszellen gefunden. ErbB2 besitzt keinen bekannten Liganden, bildet aber Heterodimere mit einem anderen ErbB Rezeptor. Diese Komplexe besitzen eine hohe Affinität zu Ihren Liganden. Durch Bindung des Liganden erfolgt eine Konformationsänderung des zytoplasmatischen Teils des Tyrosinkinaseteils des ErbB2 Rezeptors, was die Phosphorylierung des initialen PI3K/Akt Signaltransduktionscascadenproteins auslöst und damit die Zellproliferation beeinflusst. Humanes ErbB2 besteht aus 1255 Aminosäuren mit einer 21 aminosäurenlangen Leadersequenz, einer 631 amninosäurelangen extrazellulären Domäne (ED), einer 23 aminosäurenlangen Transmembranregion und einer 580 aminosäurelangen cytoplasmatischen Domäne. Der lösliche Teil (ED) kann proteolytisch vom Zelloberflächenteil abgespalten weren, ist hoch glycosyliert und zeigt ein MW von 95-105 kDa. Sequenz des Proteins: TQVCTGTDMKLRLPASPETHLDMLRHLYQGCQVVQGNLELTYLPTNASLSFLQDIQEVQGYVLIAHNQVRQVPLQRLRIVRGTQLFEDNYALAVLDNGDPLNNTTPVTGASPGGLRELQLRSLTEILKGGVLIQRNPQLCYQDTILWKDIFHKNNQLALTLIDTNRSRACHPCSPMCKGSRCWGESSEDCQSLTRTVCAGGCARCKGPLPTDCCHEQCAAGCTGPKHSDCLACLHFNHSGICELHCPALVTYNTDTFESMPNPEGRYTFGASCVTACPYNYLSTDVGSCTLVCPLHNQEVTAEDGTQRCEKCSKPCARVCYGLGMEHLREVRAVTSANIQEFAGCKKIFGSLAFLPESFDGDPASNTAPLQPEQLQVFETLEEITGYLYISAWPDSLPDLSVFQNLQVIRGRILHNGAYSLTLQGLGISWLGLRSLRELGSGLALIHHNTHLCFVHTVPWDQLFRNPHQALLHTANRPEDECVGEGLACHQLCARGHCWGPGPTQCVNCSQFLRGQECVEECRVLQGLPREYVNARHCLPCHPECQPQNGSVTCFGPEADQCVACAHYKDPPFCVARCPSGVKPDLSYMPIWKFPDEEGACQPCPINCTHSCVDLDDKGCPAEQRASPLTS

L-Asparaginase is an enzyme that depletes L-Asparagine an important nutrient for cancer cells resulting in cancer/tumor cell starvation. L-asparaginase is an anti-tumor agent derived from E.coli., which can inhibit the growth of malignant cells. It is used mainly for the induction of remission in acute lymphoblastic leukaemia. Because of the lymph node origin of malignant B cells in Multiple Myeloma, L-Asparagine is an essential amino acid for their cell metabolism, and, consequently, L-Asparaginase may be of value in managing the disease. The rationale behind asparaginase is that it takes advantage of the fact that ALL cells are unable to synthesize the non-essential amino acid asparagine whereas normal cells are able to make their own asparagine. These leukemic cells depend on circulating asparagine. Asparaginase however catalyzes the conversion of L-asparagine to aspartic acid and ammonia. This deprives the leukemic cell of circulating asparagine. L-Asparaginase produced from E.Coli has 303 amino acids and a molecular mass of 31731 Dalton.

Das Epithelial Cell Adhesion Molekül (EpCAM), auch bekannt als Antigen GA733-2 ist ein 40 kDa Transmembranglycoprotein. Es besteht aus einer 242 aminosäurelangen extrazellulären Domäne (ED), einer 23 aminosäurelangen Transmembranregion und einer 26 aminosäurelangen cytoplasmatischen Region. EpCAM wird in embryonalen Geweben sowie während der Pankreas und Leberentwicklung exprimiert. Es agiert als homotypisches Zell-Zell Adhäsionsmolekül. In Adenokarzinomen ist es signifikant überexprimiert. EpCAM ist im Zellsignalweg, bei der Migration und Proliferation und der Differenzierung involviert. Der lösliche, extrazelluläre Bereich kommt in zwei glycosylierten Formen vor: 32 kDa und 39kDa.

Vitronectin ist ein multifunktionales Glykoprotein, das im Blut und in der extrazellulären Matrix vorkommt. Es spielt eine wichtige Rolle bei einer Vielzahl biologischer Funktionen. Dazu gehören Zellanhaftung, Ausbreitung, Migration, Blutgerinnung, Plasminogenaktivierung, Fibrinolyse und die Regulierung der Komplementfunktion. Rekombinantes humanes Vitronectin (rhuVN) von Genaxxon ist ein rekombinantes humanes Protein, das eine definierte Oberfläche für die serumfreie Kultur aller Arten von Zellen, einschließlich pluripotenter Stammzellen (PSCs), bietet. Bei Verwendung eines geeigneten chemisch definierten serumfreien Mediums erhält Vitronectin nachweislich die Pluripotenz und normale Wachstumseigenschaften in mehreren PSC-Linien aufrecht. rHu VN hat eine definierte Zusammensetzung und vermeidet Lot-zu-Lot Schwankungen, die bei Vitronectin aus Plasma oder Extrakten aus EHS-Tumorgewebe auftreten. Es wird aus stabilen HEK-Zellen hergestellt, die zur posttranslationalen Modifikation (PTM) und Verarbeitung fähig sind, was dem Protein eine höhere Qualität in Bezug auf biologische Aktivität und Proteinstabilität verleiht. Durch die rekombinante Produktion ist ein Upscaling möglich, was große Erträge ermöglicht. Der offene Leserahmen von Vitronection kodiert für 459 Aminosäuren, denen ein Signalpeptid mit 19 Aminosäuren vorangestellt ist. Es enthält drei Glykosilierungsstellen, und sein Kohlenhydratanteil trägt etwa 30% zur Gesamtmolekülmasse bei.

Lysostaphin, eine spezifische Endopeptidase für Zellwandpeptidoglycane von Staphylococci, ist ein extrem potentes anti-Staphylococcus Reagenz. Lysostaphin wird in der Diagnostik und Forschung eingesetzt. Weil es Staphylococci sehr effektiv lysiert, wird es verbreitet für die Isolation von Staphylococcus DNA oder anderen zellulären Komponenten, die für genetische oder biochemische Studien benötigt werden eingesetzt. Es dient auch der Präparation von Protoplasten für Transformationen. Die Präparation und Analyse bakterieller DNA ist zu einem wichtigen Werkzeug für Mikrobiologen geworden, die in epidemiologischen Studien die Ursache für bakterielle Kontaminationen zu finden versuchen.

Recombinant Human HSA produced in mammalians is a single, glycosylated, polypeptide chain of 585 amino acids and a molecular mass of 66441 Dalton. Albumin is synthesized in the liver as preproalbumin which has an N-terminal peptide that is removed before the nascent protein is released from the rough endoplasmic reticulum. The product, proalbumin, is in turn cleaved in the Golgi vesicles to produce the secreted albumin. Albumin is a soluble, monomeric protein which comprises about one-half of the blood serum protein. Albumin functions primarily as a carrier protein for steroids, fatty acids, and thyroid hormones and plays a role in stabilizing extracellular fluid volume. Mutations in this gene on chromosome 4 result in various anomalous proteins. Albumin is a globular unglycosylated serum protein of molecular weight 65,000. The human albumin gene is 16,961 nucleotides long from the putative 'cap' site to the first poly (A) addition site. It is split into 15 exons which are symmetrically placed within the 3 domains that are thought to have arisen by triplication of a single primordial domain. HSA is widely used to stabilize blood volume generally from donors but the fear of contamination such as HIV & Hepatitis has enticed great interest in the recombinant form which is identical to the one from natural blood. This recombinant HSA is produced in Plants as a non-glycosylated, polypeptide of 585 amino acids and a molecular mass of 67 kDa. The optimum concentration for recombinant Albumin to be used in cell culture ranges between 0.5gr to 2gr per liter.