PCR-Mastermixe

PCR MasterMix mit rotem Farbstoff für die visuelle Kontrolle der Pipettierschritte: Nach der PCR kann die Elektrophorese ohne Zugabe von Ladepuffer gefahren werden. Dadurch ist dieser PCR MasterMix (2x) zeit- und kostensparend. Der PCR RedMasterMix (2x) mit rotem Farbstoff zeichnet sich zudem durch eine hohe Spezifität für beste Ergebnisse aus. Der PCR MasterMix (2x) ist eine optimierte Mischung (ready-to-use) aus: - Taq DNA Polymerase- dNTPs- MgCl2- rotem Farbstoff- Reaktionspuffer  für die effiziente Amplifikation von DNA Templates mittels PCR. Es müssen nur noch die Primer und die Template DNA dazu gegeben werden. Gleichzeitig enthält der PCR Mastermix noch einen Zusatz und einen roten Farbstoff, der es ermöglicht, eine anschließende Elektrophorese ohne Zugabe von Ladepuffer zu fahren. Dieser PCR RedMastermix wurde für die Verwendung in der Routine PCR bis 4 kb Amplikonlänge entwickelt. Die spezielle Zusammensetzung des Puffers garantiert reproduzierbare Ergebnisse selbst nach wiederholten Auftau- und Einfrierzyklen. Der PCR Mastermix mit rotem Farbstoff wird in praktischen Aliquots von 1,25mL verschickt. Unser RedMastermix kann auch für die Sanger Sequenzierung eingesetzt werden. Hierzu den PCR-Ansatz nach der PCR 1:8 verdünnen, oder mittels Spin-Säulchen aufreinigen und anschließend auftragen. Lesen Sie jetzt in unserem Blogbeitrag, wie Genaxxons RedMasterMix auch Ihnen Ihre Laborarbeit vereinfachen kann. Unsere Agarosen > und DNA Marker > sind ideal für die nachfolgende Elektrophorese geeignet.

Multiplex-PCR ist eine Methode, mit der zwei oder mehr Amplifikate gleichzeitig in einem einzigen Reaktionsgefäß / einer einzigen PRC-Reaktion amplifiziert werden können. Es ist weit verbreitet in der Genotypisierung und in verschiedenen Bereichen der DNA-Testung in Forschungs-, Forensik- und Diagnoselabors. Unser SuperHot Multiplex Mastermix (2X) ist ein gebrauchsfertiger PCR-Mastermix der die gleichzeitige Amplifikation mehrerer PCR-Produkte erleichtert und dadurch die Entwicklung von Multiplex-PCR-Assays schnell und einfach macht. Der 2-fach Mastermix ist ein optimiertes, gebrauchsfertiges Gemisch für sondenbasierte Assays wie TaqMan®, Beacons und MGBs. Es enthält eine chemisch modifizierte HotStart Taq-DNA-Polymerase, dNTPs und MgCl2 kombiniert in einem optimierten Puffersystem für Echtzeit-PCR / qPCR-Anwendungen. Primer, Sonden und Template-DNA / cDNA sind nicht enthalten. Die im SuperHot Multiplex Mastermix enthaltene SuperHotStart Taq-Polymerase ist unsere bewährte SuperHot Taq-DNA-Polymerasen M3307 > von Genaxxon, deren Polymeraseaktivität durch eine chemische Modifikation am aktiven Zentrum inaktiviert wurde. Zur Aktivierung benötigt die Polymerase eine 10-15 minütige Aktivierung bei 94°C. Das Ergebnis ist eine höhere Spezifität, eine höhere Empfindlichkeit und höhere Ausbeuten im Vergleich zu Standard-DNA-Polymerasen, wodurch dieses Enzym besonders gut für die Multiplex-PCR geeignet ist. - Amplifikation von unterschiedlichen Targets in einem einzigen PCR-Tube.- All-in-one Mastermix für das leichte multiplexen.- Hohe Spezifität, Sensitivität und Produktausbeute.- Einfaches Set-up bei Raumtemperatur. Der SuperHot Multiplex MasterMix 2X wird in Aliqutos von 1.,25mL angeboten. Unsere Standard Agarose LE > und speziell unsere hochauflösende Spezialagarose Agarose Tiny > sind ideal dazu geeignet die PCR-Fragmente nach der Multiplex PCR zu analysieren. Weitere realtime Mastermix /qPCR Mastermix können Sie hier > finden. Beispiele für Multiplexandwendungen: F. Javier Pérez-Pérez and Nancy D. Hanson, Detection of Plasmid-Mediated AmpC β-Lactamase Genes in Clinical Isolates by Using Multiplex PCR, J. Clin. Microbiol. June 2002 vol. 40 no. 6 2153-2162. doi: 10.1128/JCM.40.6.2153-2162.2002. Tamara B. Souzaa, Diego M. Lozerb, Sônia M. S. Kitagawab, Liliana C. Spanob, Neusa P. Silvac and Isabel C. A. Scaletskya, Real-Time Multiplex PCR Assay and Melting Curve Analysis for Identifying Diarrheagenic Escherichia coli. J. Clin. Microbiol. March 2013 vol. 51 no. 3 1031-1033, doi: 10.1128/JCM.02478-12.

Taq PCR Mastermix für sichere und zuverlässige PCR-Ergebnisse: für Standardanwendungen (z.B. Screening) in der Standard PCR für <5kb Amplikonlänge, wird in Aliquots von 1,25mL verschickt. Der 2-fach PCR Mastermix ist eine fertige Mischung (ready-to-use) aus Taq DNA Polymerase dNTPs MgCl2 Reaktionspuffer in einer optimalen Konzentration für die effiziente Amplifikation von DNA Templates mittels PCR. Es müssen nur noch die Primer und die Template DNA dazu gegeben werden. Dieser PCR Mastermix wurde für die Verwendung in der Standard PCR bis 4 kb Amplikonlänge entwickelt. Die spezielle Zusammensetzung des Puffers garantiert reproduzierbare Ergebnisse selbst nach wiederholten Auftau- und Einfrierzyklen. Unsere Agarosen > und DNA Marker > sind ideal für die nachfolgende Elektrophorese geeignet.

Hochspezifischer Hotstart Mastermix für Routine und Diagnostik bis 4kb, auch qPCR. Ready-to-use, bestehend aus: chemisch modifizierte Taq DNA Polymerase PCR-Puffer dNTPs MgCl2 für die HotStart PCR und qPCR. Der Super Hotstart Mastermix ist eine fertige Mischung bei optimaler Konzentration für die effiziente Amplifikation von DNA Templates mittels Hotstart PCR und qPCR. Es müssen nur noch die Primer und die Template DNA dazu gegeben werden. Dieser PCR Hotstart Mastermix wurde für die Verwendung in der Routine und der Diagnostik bis 4 kb Amplikonlänge entwickelt. Die spezielle Zusammensetzung des Puffers garantiert reproduzierbare Ergebnisse selbst nach wiederholten Auftau- und Einfrierzyklen. Der Hotstart Mastermix wird in Aliquots von 1,25mL verschickt. Diesen Mastermix gibt es auch als SuperHot Mastermix Blue > für die visuelle Kontrolle der Pipettierschritte. Mit unseren hochwertigen dNTPs als Set (M3015.4100 und M3015.0250) >, als Mix (M3016.1010) > oder unseren DNA-Markern > und unserer günstigen Standardagarose > bieten wir Ihnen weitere Produkte für die PCR.

Hotstart Mastermix mit Farbstoff für die visuelle Kontrolle der Pipettierschritte nach der Hotstart PCR: Ready-to-use mit blauem Farbstoff, auch für die qPCR. Nach der PCR kann die Elektrophorese ohne Zugabe von Ladepuffer gefahren werden. Der Hotstart Mastermix Blue besteht aus: chemisch modifizierter SuperHotstart Taq DNA Polymerase dNTPs MgCl2 Reaktionspuffer Farbstoff für die HotStart PCR und qPCR in Routine und Diagnostik. Es müssen nur noch die Primer und die Template DNA dazu gegeben werden. Der vorhandene Farbstoff erlaubt es, die Hotstart PCR-Reaktion direkt auf das Gel aufzutragen, ohne vorher mit Ladepuffer oder Loading dye mischen zu müssen. Dieser PCR Hotstart Mastermix wurde für die Verwendung in der Routine und der Diagnostik bis 4 kb Amplikonlänge sowie für die qPCR entwickelt. Die spezielle Zusammensetzung des Puffers garantiert reproduzierbare Ergebnisse selbst nach wiederholten Auftau- und Einfrierzyklen. Der Hotstart Mastermix Blue wird in Aliquots von 1,25mL verschickt.Unseren SuperHot Mastermix > gibt es auch ohne Farbstoff. Mit unseren hochwertigen dNTPs als Set (M3015.4100 und M3015.0250) > oder als Mix (M3016.1010) > oder unseren DNA-Markern > und unserer günstigen Standardagarose > bieten wir Ihnen weitere qualitativ hochwertige Produkte für die PCR.

Der RedMastermix Hot (2x) von Genaxxon für den schnellen und einfachen PCR-Ansatz und hohe Reproduzierbarkeit bei standardisierten Anwendungen (Colony PCR, High-throughput PCR, Automated PCR applications). Der Mastermix enthält einen roten Farbstoff, der das direkte Auftragen des PCR-Produktes auf das Gel ermöglicht, wobei der rote Farbstoff das Monitoring des Gellaufs ermöglicht. Gegenüber Standard Taq PCR Mastermixen ergibt die Hotstart Polymerase und die optimierte Puffermischung mit MgCl2 und dNTP eine erhöhte Ausbeute bei Amplikons bis 6kb auch unter Fast PCR-Bedingungen. Hotstart Mastermix für Routineanwendungen bis 6kb (2kb bei FAST-PCR). Ready-to-use, bestehend aus: Antikörper inhibierte Taq DNA Polymerase optimierter PCR-Puffer dNTPs MgCl2 für die HotStart PCR und qPCR. Ready-to-use Hotstart Mastermix. Es müssen nur noch die Primer und die Template DNA dazu gegeben werden. Die spezielle Zusammensetzung des Puffers garantiert reproduzierbare Ergebnisse selbst nach wiederholten Auftau- und Einfrierzyklen. Der Hotstart Mastermix wird in Aliquots von 1mL verschickt. Mit unseren hochwertigen dNTPs als Set (M3015.4100 und M3015.0250) >, als Mix (M3016.1010) > oder unseren DNA-Markern > und unserer günstigen Standardagarose > bieten wir Ihnen weitere Produkte für die PCR.

AQ97 High Fidelity DNA Polymerase ist eine proofreading Polymerase mit hoher Amplifikationsgeschwindigkeit und sehr hoher Genauigkeit (>60-fach) gegenüber Taq DNA Polymerase. AQ97 ist ideal für schwierige Targets mit sehr niedrigem oder hohem GC-Gehalt geeignet. Neben diesen Eigenschaften zeichnet sich die AQ97 auch durch Ihre Eignung, lange Targets bis zu 18 kb, zu amplifizieren aus. Dies führt zu sehr genauen und zuverlässigen PCR-Ergebnissen.  AQ97 High Fidelity DNA Polymerase besitzt sowohl eine 5'→3' DNA Polymerase-Aktivität als auch eine 3'→5' proofreading Exonuklease-Aktivität, die es dieser Polymerase ermöglicht, Basenpaar-Fehlpaarungen zu korrigieren. AQ97 High Fidelity DNA Polymerase ist ein fusionierter Proteinkomplex aus DNA-Polymerase mit einer prozessivitätssteigernden DNA-Bindungsdomäne. Neben einer sehr schnellen und robusten Amplifikation komplexer und langer Zielmoleküle zeichnet sich die AQ97 High Fidelity DNA Polymerase durch eine hohe Genauigkeit aus, was dazu führt, dass auch für lange Amplicons eine genaue Amplifikation gewährleistet ist. Dadurch eignet sich die AQ97 besonders für PCR-Experimente, die eine Amplifikation mit sehr niedrigen Fehlerraten erfordern, wie z. B. Klonen/Subklonen, NGS-Anwendungen, SNP-Analysen und Mutagenese. Eigenschaften: • High Fidelity: >60x Taq fidelity• High elongation rate: 10 sec/kb (bis 6000bp pro Minute)• Long range amplification: 18 kb for human gDNA• 5'-3' polymerase acitivity and 3'-5' exonuclease activity.• generates blund ends.Picture 1: Comparison figures of fidelity values for AQ97 DNA Polymerase, AccuPol DNA Polymerase, two well-recognized high fidelity DNA polymerases P and Q and Taq DNA Polymerase were determined through NGS-based analysis of nucleotide misincorporation during PCR. Initially, PCR amplification was performed on a ~ 200 bp synthetic DNA target, generating PCR products for each of the tested polymerases (using recommended setup conditions).  Picture 2: Distribution of substitution errors. PCR was performed using Taq DNA Polymerase, AQ97 High Fidelity DNA Polymerase, high fidelity DNA Polymerase Q and high fidelity DNA Polymerase P. The PCR was followed by NGS sequencing of the PCR products. The number of substitutions at each PCR target position was calculated and plotted in diagram A. Substitutions include misincorporated nucleotides and deletions at each position. Non-polymerase errors are subtracted from the total number of errors to revel true polymerase errors. Non-polymerase errors include mutations caused by thermocycling-induced DNA damage, pre-NGS sample preparation and sequencing errors. In these diagrams the average number of substitutions for Taq DNA Polymerase (Taq average) and for AQ97 High Fidelity DNA Polymerase (AQ97 average) is also plotted. Diagram B magnifies the area near the detection limit, displaying more information about the number of substitutions for AQ97 High Fidelity DNA Polymerase, high fidelity DNA Polymerase Q and high fidelity DNA polymerase P. Click to enlarge diagrams.  

AQ97 Hot Start High Fidelity DNA Polymerase ist eine proofreading Polymerase mit hoher Amplifikationsgeschwindigkeit und sehr hoher Genauigkeit (>60-fach) gegenüber Taq DNA Polymerase. AQ97 ist ideal für schwierige Targets mit sehr niedrigem oder hohem GC-Gehalt geeignet. Neben diesen Eigenschaften zeichnet sich die AQ97 auch durch Ihre Eignung, lange Targets bis zu 18 kb, zu amplifizieren aus. Dies führt zu sehr genauen und zuverlässigen PCR-Ergebnissen.  AQ97 High Fidelity DNA Polymerase besitzt sowohl eine 5'→3' DNA Polymerase-Aktivität als auch eine 3'→5' proofreading Exonuklease-Aktivität, die es dieser Polymerase ermöglicht, Basenpaar-Fehlpaarungen zu korrigieren. AQ97 High Fidelity DNA Polymerase ist ein fusionierter Proteinkomplex aus DNA-Polymerase mit einer prozessivitätssteigernden DNA-Bindungsdomäne. Neben einer sehr schnellen und robusten Amplifikation komplexer und langer Zielmoleküle zeichnet sich die AQ97 High Fidelity DNA Polymerase durch eine hohe Genauigkeit aus, was dazu führt, dass auch für lange Amplicons eine genaue Amplifikation gewährleistet ist. Dadurch eignet sich die AQ97 besonders für PCR-Experimente, die eine Amplifikation mit sehr niedrigen Fehlerraten erfordern, wie z. B. Klonen/Subklonen, NGS-Anwendungen, SNP-Analysen und Mutagenese. Eigenschaften: • High Fidelity: >60x Taq fidelity• High elongation rate: 10 sec/kb (bis 6000bp per minute) • Built in hot start technology• Long range amplification: 18 kb for human gDNA• 5'-3' polymerase acitivity and 3'-5' exonuclease activity.• generates blund ends. Bild 1: Die Vergleichswerte der Genauigkeitswerte für die AQ97-DNA-Polymerase, die AccuPol-DNA-Polymerase, die beiden Wettbewerber High-Fidelity-DNA-Polymerasen "P" und "Q" und die Taq-DNA-Polymerase wurden durch eine NGS-basierte Analyse des Nukleotid-Fehleinbaus während der PCR ermittelt. Die PCR-Amplifikation wurde mit einem synthetischen DNA-Target von etwa 200 bp durchgeführt, wobei für jede der getesteten Polymerasen PCR-Produkte erzeugt wurden (unter Verwendung der empfohlenen Setup-Bedingungen). Bild 2: Acht verschiedene humane genomische DNA-Targets mit einer Länge von 400 bis 800 bp und einem GC-Gehalt zwischen 29% und 78% wurden mit dem AQ97 Hot Start High Fidelity DNA Polymerase 2x Master Mix amplifiziert. Für alle Targets wurde eine robuste Amplifikation beobachtet. Für Targets mit einem GC-Gehalt von mehr als 70% wurde der Reaktionsmischung 2 M Betain Enhancer Solution zugesetzt. Marker: M.  Bild 3: Es wurden fünf verschiedene Targets aus menschlicher genomischer DNA mit einer Länge von 2 kb bis 17,5 kb amplifiziert. Für alle Targets wurde eine robuste Amplifikation mit dem AQ97 Hot Start High Fidelity DNA Polymerase 2x Master Mix beobachtet, was die Fähigkeit des Master Mixes zur Amplifikation großer und komplexer Targets belegt. Die Amplikongrößen sind am oberen Rand des Gels angegeben. Marker M: High Range DNA-Leiter.

Der Genaxxon NGSClone PCR Mastermix (2x) kombiniert eine High-Fidelity DNA-Polymerase mit Hot-Start-Technologie für präzise, schnelle und zuverlässige PCR-Ergebnisse.  Ideal für anspruchsvolle Templates wie GC-reiche DNA, cDNA oder komplexe Proben aus Tier und Pflanze. Der ready-to-use Mastermix enthält alle Komponenten – nur Primer und Template hinzufügen – und eignet sich perfekt für High-Fidelity PCR und NGS-Library Preparations.NGSClone PCR Mastermix (2x) – High-Fidelity & Hot-Start für präzise PCRMaximale Genauigkeit für anspruchsvolle PCR-AnwendungenDer Genaxxon NGSClone PCR Mastermix (2x) vereint High-Fidelity DNA-Polymerase mit Antikörper-vermittelter Hot-Start-Technologie in einem ready-to-use PCR Mastermix. Entwickelt für höchste Präzision, bietet er bis zu 120-fach höhere Fidelity im Vergleich zu Standard-Taq-Polymerasen und liefert zuverlässige Ergebnisse selbst bei GC-reichen Templates. Ideal für PCR-Anwendungen in der NGS-Library Preparation, bei cDNA-Amplifikationen oder für Tier- und Pflanzenproben.Top-Features des NGSClone PCR Mastermix (2x)Extrem hohe Genauigkeit – High-Fidelity DNA-Polymerase mit 3’-5’ Exonukleaseaktivität (Proofreading) für fehlerfreie AmplifikationenSchnelle & effiziente PCR – Optimierte Enzymstruktur mit synthetisch verstärkter Domäne für hohe Prozessivität und schnelle ExtensionsratenSchnelle Amplifikation – nur 10–15 Sekunden pro kbHot-Start-Technologie – Antikörperblockierung hält die Polymerase bei Raumtemperatur inaktiv, verhindert unspezifische Amplifikationen und erhöht so die SpezifitätBreite Anwendbarkeit – Geeignet für GC-reiche DNA, cDNA, Tier- und Pflanzenproben sowie schwierige TemplatesEinfacher Workflow – Enthält alle Komponenten (Polymerase, dNTPs, optimierter Puffer); nur Primer und DNA hinzufügenIhre Vorteile im LaborSpart Zeit und reduziert PipettierschritteMinimiert KreuzkontaminationenHohe Reproduzierbarkeit der ErgebnisseStabil auch nach wiederholtem Einfrieren und AuftauenAnwendungsbereiche High-Fidelity PCR für fehlerfreie Klonierung PCR für GC-reiche Templates cDNA-Amplifikation NGS-Library Preparation Standard-PCR mit hoher Präzision Der Genaxxon NGSClone PCR Mastermix (2x) – für schnelle, präzise und zuverlässige PCR-Ergebnisse bei maximaler Benutzerfreundlichkeit.Der Genaxxon NGSClone PCR Mastermix Red (2x) ist auch ohne roten Farbstoff erhältlich.

Der Genaxxon NGSClone PCR Mastermix Red (2x) kombiniert eine High-Fidelity DNA-Polymerase mit Hot-Start-Technologie und einem integrierten roten Loading Dye für präzise, schnelle und zuverlässige PCR-Ergebnisse – ganz ohne zusätzlichen Farbstoff vor der Gelelektrophorese. Nach der PCR können die Produkte direkt auf das Agarosegel aufgetragen werden, was Zeit spart und Pipettierschritte reduziert. Ideal für anspruchsvolle Templates wie GC-reiche DNA, cDNA oder komplexe Proben aus Tier und Pflanze. Der ready-to-use Mastermix enthält alle Komponenten – nur Primer und Template hinzufügen – und eignet sich perfekt für High-Fidelity PCR und NGS-Library Preparations.NGSClone PCR Mastermix Red (2x) – High-Fidelity & Hot-Start & Loading Dye Maximale Genauigkeit für anspruchsvolle PCR-AnwendungenDer Genaxxon NGSClone PCR Mastermix Red (2x) vereint High-Fidelity DNA-Polymerase mit Antikörper-vermittelter Hot-Start-Technologie sowie integriertem roten Loading Dye in einem ready-to-use PCR Mastermix. Entwickelt für höchste Präzision, bietet er bis zu 120-fach höhere Fidelity im Vergleich zu Standard-Taq-Polymerasen und liefert zuverlässige Ergebnisse selbst bei GC-reichen Templates. Ideal für PCR-Anwendungen in der NGS-Library Preparation, bei cDNA-Amplifikationen oder für Tier- und Pflanzenproben.Dank des enthaltenen Loading Dyes können PCR-Produkte ohne zusätzliche Vorbereitung direkt auf das Gel geladen werden.Top-Features des NGSClone PCR Mastermix Red (2x)Extrem hohe Genauigkeit – High-Fidelity DNA-Polymerase mit 3’-5’ Exonukleaseaktivität (Proofreading) für fehlerfreie AmplifikationenSchnelle & effiziente PCR – Optimierte Enzymstruktur mit synthetisch verstärkter Domäne für hohe Prozessivität und schnelle ExtensionsratenSchnelle Amplifikation – nur 10–15 Sekunden pro kbHot-Start-Technologie – Antikörperblockierung hält die Polymerase bei Raumtemperatur inaktiv, verhindert unspezifische Amplifikationen und erhöht so die SpezifitätIntegrierter roter Loading Dye – PCR-Produkt kann direkt nach der Amplifikation auf das Gel aufgetragen werdenBreite Anwendbarkeit – Geeignet für GC-reiche DNA, cDNA, Tier- und Pflanzenproben sowie schwierige TemplatesEinfacher Workflow – Enthält alle Komponenten (Polymerase, dNTPs, optimierter Puffer); nur Primer und DNA hinzufügenIhre Vorteile im LaborSpart Zeit und reduziert PipettierschritteMinimiert KreuzkontaminationenDirekter Gel-Load ohne zusätzlichen FarbstoffHohe Reproduzierbarkeit der ErgebnisseStabil auch nach wiederholtem Einfrieren und AuftauenAnwendungsbereiche High-Fidelity PCR für fehlerfreie Klonierung PCR für GC-reiche Templates cDNA-Amplifikation NGS-Library Preparation Standard-PCR mit hoher Präzision Der Genaxxon NGSClone PCR Mastermix Red (2x) – für schnelle, präzise und zuverlässige PCR-Ergebnisse bei maximaler Benutzerfreundlichkeit.Der Genaxxon NGSClone PCR Mastermix (2x) ist auch ohne roten Farbstoff erhältlich.

Genaxxon’s FAST DNA polymerase (2X) MasterMix with dye is the master mix of our FAST DNA polymerase (M3285) which is a robust enzyme, ideally suited for applications like genotyping and screening, amplifying with extreme speed of up to 2 seconds per 1kb, as well as high yield and consistency. FAST DNA polymerase has 5’-3’ exonuclease activity, but no 3’-5’ exonuclease (proofreading) activity. PCR products generated with this enzyme are A-tailed and can thus be cloned into TA cloning vectors. The extreme speed of Genaxxon’s FAST DNA polymerase allows the use of an extension rate of 4-8 kb/min. Genaxxon bioscience’s FAST DNA Polymerase (2X) MasterMix with dye includes all components needed for a fast PCR, except the primers. Besides this, it includes an inert red tracking dye for gel electrophoresis. Therefore, upon completion of the PCR, the reaction is ready for direct loading onto an agarose gel without the need of adding an additional loading buffer.Example of a typical PCR protocol (graphical presentation)* Ta is the annealing temperature (Ta should be 2°C above Tm**)  ** Tm is the melting temperature of a primer which is defined as the temperature at which 50% of the primer bind to the complementary sequence of the target DNA. Please note: By increasing Ta above Tm, this percentage decreases, however, primers will still anneal up to a certain degree and initiate extension. Therefore, PCR would still work with a Ta of several degrees higher than the Tm but with a dramatically reduced efficiency. Hence, we recommend optimizing the Ta by performing a temperature gradient (e.g., starting at the lowest Tm or a few degrees below and increasing with 2°C increments). *** Largest tested amplicon size: 5kb. Please note that longer extension times may be required for targets larger than 5kb!

Genaxxon’s FAST HotStart DNA polymerase (2X) MasterMix with dye is the master mix of our FAST HotStart DNA polymerase (M3287) which is a robust enzyme, ideally suited for applications like genotyping and screening, amplifying with extreme speed of up to 2 seconds per 1kb, as well as high yield and consistency.PCR products generated with this enzyme are A-tailed and can thus be cloned into TA cloning vectors. The extreme speed of Genaxxon’s FAST HotStart DNA polymerase allows the use of an extension rate of 4-8 kb/min. The buffer composition has been optimized via high-throughput screening and makes the enzyme particularly resistant to PCR inhibitors. Due to its robustness, Genaxxon’s FAST HotStart DNA polymerase (2X) MasterMix with dye is suitable for direct PCR from unpurified samples, including blood, urine, and bacterial colonies, making it the ideal choice for consistent results in fast complex PCR amplifications. Besides this, it includes an inert red tracking dye for gel electrophoresis. Therefore, upon completion of the PCR, the reaction is ready for direct loading onto an agarose gel without the need of adding an additional loading buffer.Example of a typical PCR protocol (graphical presentation)* Ta is the annealing temperature (Ta should be 2°C above Tm**)  ** Tm is the melting temperature of a primer which is defined as the temperature at which 50% of the primer bind to the complementary sequence of the target DNA. Please note: By increasing Ta above Tm, this percentage decreases, however, primers will still anneal up to a certain degree and initiate extension. Therefore, PCR would still work with a Ta of several degrees higher than the Tm but with a dramatically reduced efficiency. Hence, we recommend optimizing the Ta by performing a temperature gradient (e.g., starting at the lowest Tm or a few degrees below and increasing with 2°C increments). *** Largest tested amplicon size: 5kb. Please note that longer extension times may be required for targets larger than 5kb!

SimplyEnlight PCR Starter-Kit – Die All-in-One-Lösung für eine effiziente PCR Von PCR über Gelelektrophorese zur Visualisierung – das alles mit nur einem Vorbereitungsschritt! Kein späteres Pipettieren von Puffer und Farbstoffen nötig. Sparen Sie Zeit und minimieren Sie das Kontaminationsrisiko mit dem SimplyEnlight PCR Starter-Kit! Unser innovativer Red MasterMix Fluoro (2X) vereinfacht den PCR-Workflow drastisch, indem er PCR-Amplifikation, Gel-Ladefarbstoff und Nukleinsäure-Färbung in einem einzigen Reaktionsansatz kombiniert. Zusätzlich enthält der Kit den vorgefärbten GenLadder 100 bp Plus, sodass auch hier kein weiteres Anfärben mehr notwendig ist. Ihre Vorteile auf einen Blick: Schneller & effizienter PCR-Workflow – nur ein Vorbereitungsschritt erforderlich Kein zusätzliches Gel-Färben nötig – integrierter Fluoreszenzfarbstoff für direkte DNA-Sichtbarkeit Geringeres Kontaminationsrisiko – weniger Pipettierschritte, mehr Reproduzierbarkeit Nicht-toxischer Farbstoff – umweltfreundlich und sicher in der Entsorgung Optimiert für Screening & Hochdurchsatz – perfekt für Kolonie-PCR und Routineanalysen Inhalt des SimplyEnlight PCR Starter-Kits: Red MasterMix Fluoro (2X) – die 3-in-1-Lösung: PCR-MasterMix mit DNA-Polymerase, Puffer, dNTPs & MgCl₂ Integrierter roter Ladefarbstoff für sicheres Pipettieren Fluoreszierender Nukleinsäure-Farbstoff – keine zusätzliche Färbung nötig GenLadder 100 bp Plus  – fertig eingefärbter DNA-Marker: Sofortige DNA-Bandenvisualisierung unter UV- oder Blaulicht Kein separates Färben oder Pipettieren erforderlich Loading Buffer I Fluoro (6X) – für zusätzliche DNA-Marker: Flexibel einsetzbar für das Färben von weiteren DNA-Markern Bitte beachten Sie: Der DNA Loading Buffer I Fluoro zeigt zwar einen kleinen Anregungspeak im UV-Bereich, die Fluoreszenz ist jedoch deutlich intensiver bei Anregung mit Blaulicht (ca. 490nm). Wir empfehlen daher die Nutzung von Blaulicht, um die bestmöglichen Ergebnisse zu erzielen.Einfacher geht’s nicht! Mit dem SimplyEnlight PCR Starter-Kit benötigen Sie nur einen einzigen Vorbereitungsschritt: Mischen Sie Ihre DNA und Primer mit dem Red MasterMix Fluoro (2X) und starten Sie direkt mit der PCR. Anschließend kann das PCR-Produkt ohne zusätzliche Färbung in der Gelelektrophorese analysiert und visualisiert werden.Optimieren Sie Ihren PCR-Workflow – mit dem SimplyEnlight PCR Starter-Kit von Genaxxon!

Ready-to-use PCR Mastermix mit rotem Loading Dye für die visuelle Kontrolle der Pipettierschritte und zusätzlichem Fluoreszenzfarbstoff zur schnellen und einfachen Detektion der DNA-Banden. Nach der PCR kann der PCR-Ansatz direkt, ohne Zugabe von Ladepuffer, in die Geltaschen pipettiert werden. Dadurch ist der RedMasterMix Fluoro (2x) mit Fluoreszenzfarbstoff noch zeit- und kostensparender als unser bewährter Red Mastermix. Der RedMasterMix Fluoro (2x) zeichnet sich zudem durch eine hohe Spezifität für beste Ergebnisse aus. Der RedMasterMix Fluoro (2x) ist eine fertige Mischung (ready-to-use) aus: - Taq DNA Polymerase- Reaktionspuffer - dNTPs- MgCl2- rotem Loading Dye- Fluoreszenzfarbstoff zur Detektion der PCR-Banden in einer optimalen Konzentration für die effiziente Amplifikation von DNA Templates mittels PCR. Es müssen nur noch die Primer und die Template DNA dazu gegeben werden. Gleichzeitig enthält der PCR Mastermix noch einen Zusatz und einen roten Farbstoff, der es ermöglicht, eine anschließende Elektrophorese ohne Zugabe von Ladepuffer zu fahren. Nach der Elektrophorese erfolgt die Detektion direkt unter Blaulicht (ca. 490nm), ohne weiteres Anfärben. Dies spart zusätzlich Zeit und Kosten. Der RedMasterMix Fluoro (2x) mit Fluoreszenzfarbstoff wurde für die Verwendung in der Routine PCR bis 4 kb Amplikonlänge entwickelt. Die spezielle Zusammensetzung des Puffers garantiert reproduzierbare Ergebnisse selbst nach wiederholten Auftau- und Einfrierzyklen. Unser RedMasterMix (2x) Fluoro wird in praktischen Aliquots von 1,25mL verschickt.Bitte beachten Sie: Der enthaltene Farbstoff zeigt zar einen kleinen Anregungspeak im UV-Bereich, die Fluoreszenz ist jedoch deutlich intensiver bei Anregung mit Blaulicht (490nm). Wir empfehlen daher die Nutzung von Blaulicht, um die bestmöglichen Ergebnisse zu erzielen.Einmaliges Testmuster zum Sonderpreis erhältlich! Keine Versandkosten bei Versand innerhalb Deutschlands! Der Testmusterpreis wird bei der ersten offiziellen Bestellung des Produkts zurückerstattet. Unsere Agarosen > und DNA Marker > sind ideal für die nachfolgende Elektrophorese geeignet.

Lyo-ready qPCR Multiplex MastermixLeistungsstarke All-in-one-Lösung für die multiplexe Real-Time PCR – optimiert für hohe Sensitivität und Lyophilisierung.Dieser hochkonzentrierte 5x qPCR MasterMix wurde speziell für multiplexe Real-Time PCR-Anwendungen entwickelt. Er ermöglicht den Nachweis von bis zu 30 Targets in einer einzigen Reaktion, erlaubt die Amplifikation direkt aus Probenmaterial wie Blut oder Abstrichen (keine Extraktion erforderlich) und bietet durch die 5-fache Konzentration mehr Möglichkeiten für Primer und Sonden – ohne Einbußen bei der Sensitivität. Vollständig lyophilisierbar und damit ideal für die Kit-Herstellung, den Versand bei Raumtemperatur und die langfristige Lagerung ohne Kühlung.Wichtigste Vorteile auf einen Blick:Sensitiv – Mehr Möglichkeiten für das Wesentliche Durch die 5-fache Konzentration steht mehr Volumen für target-spezifische Primer und Sonden zur Verfügung. Perfekt für hochgradige Multiplex-Assays ohne Sensitivitätsverlust.Robust – Zuverlässige Ergebnisse bei allen Targets Der MasterMix gewährleistet eine gleichmäßige und konsistente Amplifikation – selbst in komplexen Multiplex-Panels. Schnell – Direkte PCR, keine Extraktion Funktioniert direkt mit Probenmaterial wie Blut oder Abstrichen – ohne zeitaufwändige DNA-Extraktionsschritte.Spezifisch – Präzision eingebaut Die optimierte Taq-Polymerase mit aptamerbasierter Hot-Start-Technologie verhindert unspezifische Amplifikation und sorgt für einen schnellen Start bei Raumtemperatur. Lyo Ready – Ideal für die Lyophilisierung Mit allen notwendigen Hilfsstoffen für die Gefriertrocknung formuliert. Kann bei Ihnen oder durch uns lyophilisiert werden. Nach dem Trocknen geeignet für Lagerung und Versand bei Raumtemperatur – perfekt für die Kit-Produktion und den Feldeinsatz.Application Note:Erfahren Sie mehr über die Anwendung des Produkts in der Praxis – die Application Note steht Ihnen hier zum Download bereit.Lesen Sie jetzt in unserem Blogartikel, warum der 5x qPCR Multiplex MasterMix optimal für Ihre Multiplex-qPCR ist. Weitere Realtime PCR Mastermixe passend für Ihre PCR finden Sie hier.Beispiele für Multiplexandwendungen:F. Javier Pérez-Pérez and Nancy D. Hanson, Detection of Plasmid-Mediated AmpC β-Lactamase Genes in Clinical Isolates by Using Multiplex PCR, J. Clin. Microbiol. June 2002 vol. 40 no. 6 2153-2162. doi: 10.1128/JCM.40.6.2153-2162.2002. Tamara B. Souzaa, Diego M. Lozerb, Sônia M. S. Kitagawab, Liliana C. Spanob, Neusa P. Silvac and Isabel C. A. Scaletskya, Real-Time Multiplex PCR Assay and Melting Curve Analysis for Identifying Diarrheagenic Escherichia coli. J. Clin. Microbiol. March 2013 vol. 51 no. 3 1031-1033, doi: 10.1128/JCM.02478-12.

Multiplex-PCR ist eine Methode, mit der zwei oder mehr Amplifikate gleichzeitig in einem einzigen Reaktionsgefäß / einer einzigen Reaktion amplifiziert werden können. Es ist weit verbreitet in der Genotypisierung und in verschiedenen Bereichen der DNA-Testung in Forschungs-, Forensik- und Diagnoselabors. Unser Multiplex HS Mastermix (2X) ist ein gebrauchsfertiger PCR-Mastermix der die gleichzeitige Amplifikation mehrerer PCR-Produkte erleichtert und dadurch die Entwicklung von Multiplex-PCR-Assays schnell und einfach macht. Der 2-fach Mastermix ist ein optimiertes, gebrauchsfertiges Gemisch für sondenbasierte Assays wie TaqMan®, Beacons und MGBs. Es enthält eine modifizierte HotStart Taq-DNA-Polymerase, dNTPs und MgCl2 kombiniert in einem optimierten Puffersystem für Echtzeit-PCR / qPCR-Anwendungen. Primer, Sonden und Matrizen-DNA / cDNA sind nicht enthalten. Die im Multiplex HS enthaltene HotStart Taq-Polymerase basiert auf der Standard-Taq-DNA-Polymerase von Genaxxon, die durch einen spezifischen Antikörper inaktiviert wurde. Während der ersten Denaturierungsphase wird der Antikörper denaturiert und dadurch die Taq wieder aktiviert. Das Ergebnis ist eine höhere Spezifität, eine höhere Empfindlichkeit und höhere Ausbeuten im Vergleich zu Standard-DNA-Polymerasen, wodurch dieses Enzym besonders gut für die Multiplex-PCR geeignet ist. - Amplifikation von unterschiedlichen Targets in einem einzigen PCR-Tube.- All-in-one Mastermix für das leichte multiplexen.- Hohe Spezifität, Sensitivität und Produktausbeute.- Einfaches Set-up bei Raumtemperatur. Der Multiplex HS MasterMix 2X wird in Aliqutos von 1mL angeboten. Unsere Standard Agarose LE > und speziell unsere hochauflösende Spezialagarose Agarose Tiny > sind ideal dazu geeignet die PCR-Fragmente nach der Multiplex PCR zu analysieren. Weitere realtime Mastermix /qPCR Mastermix können Sie hier > finden. Beispiele für Multiplexandwendungen: F. Javier Pérez-Pérez and Nancy D. Hanson, Detection of Plasmid-Mediated AmpC β-Lactamase Genes in Clinical Isolates by Using Multiplex PCR, J. Clin. Microbiol. June 2002 vol. 40 no. 6 2153-2162. doi: 10.1128/JCM.40.6.2153-2162.2002. Tamara B. Souzaa, Diego M. Lozerb, Sônia M. S. Kitagawab, Liliana C. Spanob, Neusa P. Silvac and Isabel C. A. Scaletskya, Real-Time Multiplex PCR Assay and Melting Curve Analysis for Identifying Diarrheagenic Escherichia coli. J. Clin. Microbiol. March 2013 vol. 51 no. 3 1031-1033, doi: 10.1128/JCM.02478-12.

Lyophilisierter 5x Multiplex PCR Mastermix für eine robuste qPCR zur schnellen, sensitiven und reproduzierbaren parallelen Quantifizierung verschiedener Templates. Die optimierte DNA-Polymerase und ein optimiertes Puffersystem einschließlich unserer hochreinen dNTPs sind Schlüsselkomponenten dieses ready-to-use qPCR Mastermixes. Die Hotstart-Formulierung der enthaltenen DNA-Polymerase verhindert eine falsche Amplifikation vor dem ersten Denaturierungsschritt und sorgt somit für die benötigte Spezifität. Unser Mastermix funktioniert mit einer breiten Palette an Templates, inklusive humaner, tierischer oder auch Pflanzen-DNA. Eigenschaften:- 5-fach konzentriert für mehr Wahlmöghlichkeit für das Primer- und Probevolumen.- Amplifikation von unterschiedlichen Targets in einem einzigen PCR-Tube (für bis zu 4 Targets getestet).- All-in-one Mastermix für das leichte multiplexen.- Hohe Spezifität, Sensitivität und Produktausbeute.- die Hot-Start-Formulierung der enthaltenen DNA-Polymerase verhindert eine falsche Amplifikation während des Reaktionsaufbaus Unser neuer lyphilisierter 5-fach Multiplex Mastermix minimiert die Notwendigkeit zur Optimierung und macht daher die Entwicklung und Etablierung der Multiplex-PCR einfacher und schneller. Stabilität- der lyophilisierte MasterMix ist für 3 Jahre stabil, wenn er bei -20°C gelagert wird.- der lyophilisierte MasterMix ist mindestens 12 Monate stabil, wenn er, nach der Anlieferung, bei +15°C bis +30°C gelagert wird.- der rekonstituierte MasterMix ist für min. 6 Monate stabil, wenn er bei -20°C gelagert wird. Lesen Sie jetzt in unserem Blogartikel, warum der 5x qPCR Multiplex MasterMix optimal für Ihre Multiplex-qPCR ist. Weitere Realtime PCR Mastermixe passend für Ihre PCR finden Sie hier >. Beispiele für Multiplexandwendungen:F. Javier Pérez-Pérez and Nancy D. Hanson, Detection of Plasmid-Mediated AmpC β-Lactamase Genes in Clinical Isolates by Using Multiplex PCR, J. Clin. Microbiol. June 2002 vol. 40 no. 6 2153-2162. doi: 10.1128/JCM.40.6.2153-2162.2002. Tamara B. Souzaa, Diego M. Lozerb, Sônia M. S. Kitagawab, Liliana C. Spanob, Neusa P. Silvac and Isabel C. A. Scaletskya, Real-Time Multiplex PCR Assay and Melting Curve Analysis for Identifying Diarrheagenic Escherichia coli. J. Clin. Microbiol. March 2013 vol. 51 no. 3 1031-1033, doi: 10.1128/JCM.02478-12.

Die Genaxxon SNP Pol DNA-Polymerase, die für den SNP Pol DNA-Polymerase 2X Mastermix eingesetzt wird, wurde speziell für die einfache, verlässliche und schnelle spezifische Unterscheidung von Allelen, z. B. bei CRISPR/Cas9-gesetzten Punktmutationen, beim Erkennen falscher CRISPR/Cas9-Produkte oder bei der Validierung von Sequenzierergebnissen, entwickelt. Die SNP Pol DNA-Polymerase erkennt hochspezifisch, ob eine Fehlpaarung (Mismatch) des Primer-Template-Komplexes vorliegt oder nicht. Die Fehlpaarung (Punktmutation) muss sich am 3´-Ende des Primers befinden. Somit können mutante Allele exakt von Wildtypallelen unterschieden werden - ohne Sequenzierung, da die Polymerase im Fall einer Fehlpaarung schlichtweg nicht amplifiziert. Legen Sie Ihren Primer einfach auf die angenommene Punktmutation (Wichtig: Die Punktmutation muss am 3'-Ende sein) und die Polymerase erkennt eine Fehlpaarung in diesem Bereich mit 100% Genauigkeit: Wenn die zum 3'-Ende des Primers komplementäre Base auf dem DNA-Strang die Mutation zeigt und der Primer nicht, dann erfolgt keinerlei Amplifikation - schnelle Gewissheit zu 100%! Die SNP Pol DNA-Polymerase kann daher einfach, zeit- und kosteneffizient für das Screening von Punktmutationen eingesetzt werden. Die Variante SNP PolTaq DNA-Polymerase > besitzt 5'-3'-Nukleaseaktivität und kann daher mit spezifischen Primersonden wie Taqman® Sonden oder Molecular beacons eingesetzt werden. Für mehr Informationen zu unseren SNP DNA-Polymerasen und Anwendungsbereiche lesen Sie jetzt unseren Blogbeitrag. BeschreibungDie SNP PolTaq DNA-Polymerase ist eine hochselektive DNA-Polymerase zur Detektion von Single Nucleotide Polymorphisms. Sie wurde speziell für die allelspezifische Diskriminierung entwickelt, bei der eine sehr hohe Unterscheidungsrate (high discrimination) benötigt wird: z.B. bei der Allelspezifischen PCR (ASA; AS-PCR), Allelspezifischen Primerextension (AS-PEX), SNP Analyse, Genotypisierung oder bei methylierungsspezifischen PCRs (MSP). Viele DNA-Polymerasen tolerieren fehlgepaarte Primer-Template Komplexe. Die SNP Pol DNA-Polymerase dagegen unterscheidet diese spezifisch (high discrimination) und liefert gezielt nur PCR-Produkte bei perfekt passenden Primerpaaren! Die Genaxxon SNP Pol und SNP PolTaq DNA-Polymerasen unterscheiden bis zu 100% mittels allelspezifischer PCR zwischen den beiden Allelen und ergeben nach einer simplen qPCR eine eindeutige Aussage, welches Allel vorliegt. Somit kann das prinzipiell große Potential der CRISPR/Cas9 Technologie mit der SNP PolTaq bzw. der SNP DNA-Polymerase für die Humanmedizin und Pflanzenbiotechnologie genutzt werden. Mittels allelspezifischer PCR kann man die Mutationsrate in einem Pool oder Hintergrund von Wildtyp-Sequenzen quantifizieren. Auch die Überprüfung von Mutationshäufigkeiten, die durch NGS bestimmt wurden, kann mittels allelspezifischer PCR und SNP Pol DNA-Polymerase verifiziert werden. Sehr gut geeignet ist die SNP PolTaq DNA-Polymerase zur Analyse von Liquid Biopsie Proben. Mit ihr kann die Anwesenheit und Häufigkeit von Krebsmutationen sehr gut analysiert und quantifiziert werden. Bild: Anwendungsbeispiel SNP Pol DNA Polymerase Wir empfehlen die Anwendung von Primern für kurze Amplicons (ca. 60-200 bp) für optimale Ergebnisse. Längere Amplicons sind ebenfalls möglich. Bei längeren Amplicons >500 bp ist unter Umständen der Zusatz von Magnesium (+0.5 - 1.5mM) erforderlich. Trouble shooting:Keine Banden nach PCR von 30 Zyklen!Optimierungsvorgehen bei fehlender oder schwacher Bande Annealingtemperatur ist zu niedrig! Achtung: Die SNP Pol ist eine aptamer inhibierte DNA-Polymerase. Das eingesetzte Aptamer-Oligo inhibiert die Polymerase reversibel bei Temperaturen <55°C! Daher sollten die Primer eine Annealingtemperatur von am besten >57°C haben. - realtime PCR Ansatz- Überprüfen der dNTP-Konzentration. Diese sollte zwischen 200 und 300µM (in der PCR) liegen.- Erhöhen der Zyklenzahl (mindestens 35, besser gleich 40) Test Optimierung - ZyklenzahlBei der Endpunktsdetektion ist eine Zyklenanzahl von 30 nicht immer ausreichen, um eine gut sichtbare Bande zu generien. Zum Beispiel bei weniger als 200 DNA-Kopien als Ausgangswert. Daher sollte der Test mittels realtime PCR gefahren werden, oder man setzt fünf parallele PCRs an, von denen jeweils eine nach fünf unterschiedlichen Zyklen aus dem PCR-Gerät entnommen wird (Beispiel unten). Endpunktsdetektion:Setzen Sie parallel fünf gleiche PCR-Reaktionen mit der SNP Pol DNA-Polymerase an. Nehmen Sie bei 20, 25, 30,35 und 40 Zyklen jeweils eines der PCR-Tubes aus dem Cycler und tragen am Ende alle fünf Reaktionen auf ein Agarosegel auf. Damit lässt sich dann einfach erkennen, welches die optimale Zyklenzahl in der PCR für die gegebene Anwendung (Ausgangsmaterial, Target, Primer) ist. SNP Pol PCR mit ZelllysatenTierische Zellen und E.coli können direkt für die PCR mit der SNP Pol DNA-Polymerase herangezogen werden! Es ist keine separate Lyse und kein Proteinase K-Verdau notwendig.Vorgehen PCR-Ansatz: 1. Es werden 50 - 500 Zellen pro PCR-Ansatz benötigt!2. PCR Mix mit Primern und Puffer vorbereiten und auf Eis stellen!3. Die gepickte Kolonie direkt in 10-20µL Wasser (keine separate Lyse und kein Proteinase K-Verdau) geben, kurz vortexen (5 Sekunden), diese Zell-Suspension dann direkt in den PCR-Reaktionsansatz geben, z.B. 10µL Zellsuspension für einen PCR-Ansatz mit 20µL Gesamtvolumen. Anfängliche Denaturierungszeit von 2-3 Minutenreicht aus, kann notfalls auf 5 Minuten verlängert werden.Genomische DNA pro Reaktion max. 100 Kopien ist relativ gering, sollte aber noch gehen.Der Rest dieser Zell-Suspension kann auch weggefroren werden, um weitere Tests damit durchzuführen. Optional: 4. wenn es möglich ist: real-time PCR machen! Die SNP Pol DNA-Polymerase (M3009 >) oder (M3061 >) kann zusammen mit unspezifischen Fluoreszenzfarbstoffen (z.B. Green DNA Dye > von Genaxxon oder SybrGreen®) in der realtime PCR eingesetzt werden. Wenn mit spezifischen PCR-Probes gearbeitet wird, ist nur die SNP PolTaq DNA-Polymerase dafür einsetzbar, da nur diese eine 5'-3' Exonukleaseaktivität besitzt. Mit unseren hochwertigen dNTPs als Set (M3015.4100 und M3015.0250) > oder als Mix (M3016.1010) > oder unseren DNA-Markern > und unserer günstigen Standardagarose > bieten wir Ihnen weitere Produkte für die PCR. Anwendungsgebiete für die SNP Pol DNA-Polymerase- Monitoring, verification and detection of point mutations- Identification of correct or wrong CRISPR/Cas9 products- Verification/validation of sequencing results- Quantification of mutations (e.g. NGS results)- SNP-detection by allele-specific amplification (ASA) / Allele-specific PCR- Methylation specific PCRs (MSP) after bisulfite treated DNA (CpG methylation sides)- HLA genotyping- micro sequencing- realtime PCR with hydrolysis probes- realtime multiplex PCRs - DamID-seq data in C. elegans. Sharma R, Ritler D, Meister P. Tools for DNA adenine methyltransferase identification analysis of nuclear organization during C. elegans development. Genesis. 2016 Feb 4. doi: 10.1002/dvg.22925. - Minisequencing SNP genotyping with SNPase DNA Polymerase can be carried out by the procedure described in: Lovmar L, Fredriksson M, Liljedahl U, Sigurdsson S, Syvänen AC. Quantitative evaluation by minisequencing and microarrays reveals accurate multiplexed SNP genotyping of whole genome amplified DNA. Nucleic Acids Res. 2003;31:e129. - Allel specific mismatch selectivity by the HiDi DNA polymerase Drum M, Kranaster R, Ewald C, Blasczyk R, Marx A (2014) Variants of a Thermus aquaticus DNA Polymerase with Increased Selectivity for Applications in Allele- and Methylation-Specific Amplification. PLoS ONE 9(5): e96640. doi:10.1371/journal.pone.0096640

Die Genaxxon SNP PolTaq DNA-Polymerase, die für den SNP PolTaq DNA-Polymerase 2X Mastermix eingesetzt wird, wurde speziell für die einfache, verlässliche und schnelle spezifische Unterscheidung von Allelen, z. B. bei CRISPR/Cas9-gesetzten Punktmutationen, beim Erkennen falscher CRISPR/Cas9-Produkte oder bei der Validierung von Sequenzierergebnissen, entwickelt. Die SNP PolTaq DNA-Polymerase erkennt hochspezifisch, ob eine Fehlpaarung (Mismatch) des Primer-Template-Komplexes vorliegt oder nicht. Die Fehlpaarung (Punktmutation) muss sich am 3´-Ende des Primers befinden. Somit können mutante Allele exakt von Wildtypallelen unterschieden werden - ohne Sequenzierung, da die Polymerase im Fall einer Fehlpaarung schlichtweg nicht amplifiziert. Legen Sie Ihren Primer einfach auf die angenommene Punktmutation (Wichtig: Die Punktmutation muss am 3'-Ende sein) und die Polymerase erkennt eine Fehlpaarung in diesem Bereich mit 100% Genauigkeit: Wenn die zum 3'-Ende des Primers komplementäre Base auf dem DNA-Strang die Mutation zeigt und der Primer nicht, dann erfolgt keinerlei Amplifikation - schnelle Gewissheit zu 100%! Die SNP PolTaq DNA-Polymerase kann daher einfach, zeit- und kosteneffizient für das Screening von Punktmutationen eingesetzt werden. Die SNP PolTaq DNA-Polymerase besitzt 5'-3'-Nukleaseaktivität und kann daher mit spezifischen Sonden wie Taqman® Sonden oder Molecular beacons eingesetzt werden. Für mehr Informationen zu unseren SNP DNA-Polymerasen und Anwendungsbereiche lesen Sie jetzt unseren Blogbeitrag. BeschreibungDie SNP PolTaq DNA-Polymerase ist eine hochselektive DNA-Polymerase zur Detektion von Single Nucleotide Polymorphisms. Sie wurde speziell für die allelspezifische Diskriminierung entwickelt, bei der eine sehr hohe Unterscheidungsrate (high discrimination) benötigt wird: Z.B. bei der Allelspezifischen PCR (ASA; AS-PCR), Allelspezifischen Primerextension (AS-PEX), SNP Analyse, Genotypisierung oder bei methylierungsspezifischen PCRs (MSP). Viele DNA-Polymerasen tolerieren fehlgepaarte Primer-Template Komplexe. Die SNP Pol DNA-Polymerase dagegen unterscheidet diese spezifisch (high discrimination) und liefert gezielt nur PCR-Produkte bei perfekt passenden Primerpaaren! Die Genaxxon SNP Pol und SNP PolTaq DNA-Polymerasen unterscheiden bis zu 100% mittels allelspezifischer PCR zwischen den beiden Allelen und ergeben nach einer simplen qPCR eine eindeutige Aussage, welches Allel vorliegt. Somit kann das prinzipiell große Potential der CRISPR/Cas9 Technologie mit der SNP PolTaq bzw. der SNP DNA-Polymerase für die Humanmedizin und Pflanzenbiotechnologie genutzt werden. Mittels allelspezifischer PCR kann man die Mutationsrate in einem Pool oder Hintergrund von Wildtyp-Sequenzen quantifizieren. Auch die Überprüfung von Mutationshäufigkeiten, die durch NGS bestimmt wurden, kann mittels allelspezifischer PCR und SNP Pol DNA-Polymerase verifiziert werden. Sehr gut geeignet ist die SNP PolTaq DNA-Polymerase zur Analyse von Liquid Biopsie Proben. Mit ihr kann die Anwesenheit und Häufigkeit von Krebsmutationen sehr gut analysiert und quantifiziert werden. Bild: Anwendungsbeispiel SNP Pol DNA Polymerase Wir empfehlen die Anwendung von Primern für kurze Amplicons (ca. 60-200 bp) für optimale Ergebnisse. Längere Amplicons sind ebenfalls möglich. Bei längeren Amplicons >500 bp ist unter Umständen der Zusatz von Magnesium (+0.5 - 1.5mM) erforderlich. Trouble shooting:Keine Banden nach PCR von 30 Zyklen!Optimierungsvorgehen bei fehlender oder schwacher Bande Annealingtemperatur ist zu niedrig! Achtung: Die SNP PolTaq ist eine aptamer inhibierte DNA-Polymerase. Das eingesetzte Aptamer-Oligo inhibiert die Polymerase reversibel bei Temperaturen <55°C! Daher sollten die Primer eine Annealingtemperatur von am besten >57°C haben. - realtime PCR Ansatz- Überprüfen der dNTP-Konzentration. Diese sollte zwischen 200 und 300µM (in der PCR) liegen.- Erhöhen der Zyklenzahl (mindestens 35, besser gleich 40) Test Optimierung - ZyklenzahlBei der Endpunktsdetektion ist eine Zyklenanzahl von 30 nicht immer ausreichen, um eine gut sichtbare Bande zu generien. Zum Beispiel bei weniger als 200 DNA-Kopien als Ausgangswert. Daher sollte der Test mittels realtime PCR gefahren werden, oder man setzt fünf parallele PCRs an, von denen jeweils eine nach fünf unterschiedlichen Zyklen aus dem PCR-Gerät entnommen wird (Beispiel unten). Endpunktsdetektion:Setzen Sie parallel fünf gleiche PCR-Reaktionen mit der SNP Pol DNA-Polymerase an. Nehmen Sie bei 20, 25, 30,35 und 40 Zyklen jeweils eines der PCR-Tubes aus dem Cycler und tragen am Ende alle fünf Reaktionen auf ein Agarosegel auf. Damit lässt sich dann einfach erkennen, welches die optimale Zyklenzahl in der PCR für die gegebene Anwendung (Ausgangsmaterial, Target, Primer) ist. SNP Pol PCR mit ZelllysatenTierische Zellen und E.coli können direkt für die PCR mit der SNP Pol DNA-Polymerase herangezogen werden! Es ist keine separate Lyse und kein Proteinase K-Verdau notwendig.Vorgehen PCR-Ansatz: 1. Es werden 50 - 500 Zellen pro PCR-Ansatz benötigt!2. PCR Mix mit Primern und Puffer vorbereiten und auf Eis stellen!3. Die gepickte Kolonie direkt in 10-20µL Wasser (keine separate Lyse und kein Proteinase K-Verdau) geben, kurz vortexen (5 Sekunden), diese Zell-Suspension dann direkt in den PCR-Reaktionsansatz geben, z.B. 10µL Zellsuspension für einen PCR-Ansatz mit 20µL Gesamtvolumen. Anfängliche Denaturierungszeit von 2-3 Minuten reicht aus, kann notfalls auf 5 Minuten verlängert werden.Genomische DNA pro Reaktion max. 100 Kopien ist relativ gering, sollte aber noch gehen.Der Rest dieser Zell-Suspension kann auch weggefroren werden, um weitere Tests damit durchzuführen. Optional: 4. wenn möglich: real-time PCR machen! Die SNP Pol DNA-Polymerase (M3009 >) oder (M3061 >) kann zusammen mit unspezifischen Fluoreszenzfarbstoffen (z.B. Green DNA Dye > von Genaxxon oder SybrGreen®) in der realtime PCR eingesetzt werden. Wenn mit spezifischen PCR-Probes gearbeitet wird, ist nur die SNP PolTaq DNA-Polymerase dafür einsetzbar, da nur diese eine 5'-3' Exonukleaseaktivität besitzt. Mit unseren hochwertigen dNTPs als Set (M3015.4100 und M3015.0250) > oder als Mix (M3016.1010) > oder unseren DNA-Markern > und unserer günstigen Standardagarose > bieten wir Ihnen weitere Produkte für die PCR. Anwendungsgebiete für die SNP Pol DNA-Polymerase- Monitoring, verification and detection of point mutations- Identification of correct or wrong CRISPR/Cas9 products- Verification/validation of sequencing results- Quantification of mutations (e.g. NGS results)- SNP-detection by allele-specific amplification (ASA) / Allele-specific PCR- Methylation specific PCRs (MSP) after bisulfite treated DNA (CpG methylation sides)- HLA genotyping- micro sequencing- realtime PCR with hydrolysis probes- realtime multiplex PCRs - DamID-seq data in C. elegans. Sharma R, Ritler D, Meister P. Tools for DNA adenine methyltransferase identification analysis of nuclear organization during C. elegans development. Genesis. 2016 Feb 4. doi: 10.1002/dvg.22925. - Minisequencing SNP genotyping with SNPase DNA Polymerase can be carried out by the procedure described in: Lovmar L, Fredriksson M, Liljedahl U, Sigurdsson S, Syvänen AC. Quantitative evaluation by minisequencing and microarrays reveals accurate multiplexed SNP genotyping of whole genome amplified DNA. Nucleic Acids Res. 2003;31:e129. - Allel specific mismatch selectivity by the HiDi DNA polymerase Drum M, Kranaster R, Ewald C, Blasczyk R, Marx A (2014) Variants of a Thermus aquaticus DNA Polymerase with Increased Selectivity for Applications in Allele- and Methylation-Specific Amplification. PLoS ONE 9(5): e96640. doi:10.1371/journal.pone.0096640

Description Taq DNA Polymerase 1.1x Master Mix is a ready-to-use 1.1x reaction mix with the Ampliqon Taq DNA polymerase, the NH4+ buffer system, dNTPs and magnesium chloride present. A 50µL reaction requires 45µL of the 1.1x Master Mix. Simply add primers, template and water to a total reaction volume of 50µL to successfully carry out primer extensions and other molecular biology applications. Taq DNA Polymerase 1.1x Master Mix offers several advantages. Set up time is significantly reduced. The chance of contaminating component stocks is eliminated. Reduction of reagent handling steps leads to better reproducibility. Standard tests can be set up with the confidence that results will be consistent every time. Weitere PCR-Mastermixe von Genaxxon und Ampliqon finden Sie hier >. Unsere Agarosen > und DNA Marker > sind ideal für die nachfolgende Elektrophorese geeignet.

Taq OptiMix CLEAR is an optimised format of Taq DNA Polymerase Master Mix and is therefore a good alternative to Taq DNA Polymerase and Taq DNA Polymerase Master Mix. Taq OptiMix CLEAR ensures the user an increased specificity and improved PCR performance, even on difficult templates. Taq OptiMix CLEAR offers reduced set-up time and eliminates the risk of contamination of reaction components. Taq OptiMix CLEAR is suitable for standard PCR applications, screening and high throughput testing. Taq OptiMix CLEAR is an further improved version of the already existing ready-to-use 2x master mix with the Ampliqon Taq DNA polymerase, the NH4+ buffer system, dNTPs and magnesium chloride present. Each reaction requires 25µL of the Taq OptiMix CLEAR. Simply add primers, template and water to a total reaction volume of 50µL to successfully carry out primer extensions and other molecular biology applications. Taq OptiMix CLEAR offers several advantages: - Reduced set up time and risk of contamination. - Fewer reagent handling steps- resulting in higher reproducibility. - Optimized for specificity. Composition of the Taq OptiMix CLEAR (2x) Tris-HCl pH8.5, (NH4)2S04, 3mM MgCl2, 0.2% Tween®20 0.4mM of each dNTP 0.08 units/µL Ampliqon Taq DNA polymerase Recommended Storage and Stability:Long term storage at -20 °C. Product expiry at -20 °C is stated on the label. Quality Control:Taq DNA Polymerase is tested for contaminating activities, with no traces of endonuclease activity, nicking activity or exonuclease activity. Unit Definition:One unit is defined as the amount of polymerase that incorporates 10 nmoles of dNTPs into acid-precipitable DNA in 30 minutes at 72 °C under standard assay conditions. Weitere PCR-Mastermixe von Genaxxon und Ampliqon finden Sie hier. Unsere Agarosen und DNA Marker sind ideal für die nachfolgende Elektrophorese geeignet.

Description Taq DNA Polymerase 1.1x Master Mix RED is a ready-to-use 1.1x reaction mix with the Ampliqon Taq DNA polymerase, the NH4+ buffer system, dNTPs and magnesium chloride present. Each reaction requires 45μL of the 1.1x Master Mix RED. Simply add primers, template and water to a total reaction volume of 50μL to successfully carry out primer extensions and other molecular biology applications. Taq DNA Polymerase 1.1x Master Mix RED offers several advantages. Setup time is significantly reduced. The chance of contaminating  component stock is eliminated.   Reduction of reagent handling steps leads to better reproducibility. Standard tests can be setup with the confidence that results will be consistent every time. There is no need to buy and use separate loading dyes. Simply load a portion of the PCR reaction product on to an agarose gel for electrophoresis and subsequent visualization. The red dye front runs at 1000 to 2000 bp on a 0.5 to 1.5% agarose gel. Unsere Agarosen > und DNA Marker > sind ideal für die nachfolgende Elektrophorese geeignet.

Taq DNA Polymerase Master Mix Red is a good alternative to Taq DNA Polymerase Master Mix with the same advantages. The inert red dye and a stabilizer are extra features, which allow direct loading onto your agarose gel for analysis. Features     No need for separate loading dye    Taq DNA Polymerase Master Mix Red is ready-made for electrophoresis and visualization    Fewer handling steps Description Taq DNA Polymerase Master Mix Red is a ready to use as a 2x reaction mix. Taq DNA Polymerase Master Mix Red is available in two final MgCl2 concentrations: 1.5mM and 2.0mM. Taq DNA Polymerase Master Mix Red is composed of Ampliqon Taq DNA Polymerase, the NH4+ buffer system, dNTPs and magnesium chloride.  Unsere Agarosen > und DNA Marker > sind ideal für die nachfolgende Elektrophorese geeignet.

Taq DNA Polymerase Master Mix Red is a good alternative to Taq DNA Polymerase Master Mix with the same advantages. The inert red dye and a stabilizer are extra features, which allow direct loading onto your agarose gel for analysis. Features     No need for separate loading dye    Taq DNA Polymerase Master Mix Red is ready-made for electrophoresis and visualization    Fewer handling steps Description Taq DNA Polymerase Master Mix Red is a ready to use as a 2x reaction mix. Taq DNA Polymerase Master Mix Red is available in two final MgCl2 concentrations: 1.5mM and 2.0mM. Taq DNA Polymerase Master Mix Red is composed of Ampliqon Taq DNA Polymerase, the NH4+ buffer system, dNTPs and magnesium chloride.  Unsere Agarosen und DNA Marker sind ideal für die nachfolgende Elektrophorese geeignet.

About TEMPase Hot Start Master Mix TEMPase Hot Start Master Mix is a ready to use mix that offers easy reaction assembly at room temperature prior to hot start PCR. Just add template and primers. TEMPase Hot Start 2x Master Mix is an alternative to TEMPase Hot Start DNA Polymerase applicable for primer extensions and other amplification purposes. Features     Minimal optimization needed    Convenient reaction set up    Fewer pipetting steps    Consistent test resultsBeschreibung: Der Mastermix enthält die Ampliqon TEMPase Hot Start DNA Polymerase, dNTPs, MgCl2 und PCR-Puffer C, als gebrauchsfertigen 2-fach PCR Mastermix. Der "Combination Buffer" (PCR buffer C) enthält ein optimiertes Gemisch aus KCl und (NH4)2SO4. TEMPase Hot Start DNA Polymerase ist eine chemisch modifizierte Ampliqon Taq DNA-Polymerase, die durch einen 15 minütige Hitzebehandlung aktiviert wird.Bei der TEMPase ist ein zusätzliches Molekül an das aktive Zentrum der Polymerase gebunden, welches dafür sorgt, dass die Polymerase vor der ersten Hitzeaktivierung inaktiv bleibt. Somit ist die Polymerase während des setups und vor dem ersten Denaturierungsschritt in der PCR inaktiv und kann falsch angelagerte Primer nicht verlängern, bzw. vervielfältigen. Sobald aber mindestens 10 Minuten, besser 15 Minuten auf 95°C erhitzt wurde, wird das inhibierende Molekül abgespalten und hinterlässt die aktive Taq DNA-Polymerase in das PCR Reaktionsgemisch. Beachten Sie auch den Genaxxon SuperHot Hot Start Mastermix > mit und ohne Farbstoff. Mit unseren hochwertigen dNTPs als Set (M3015.4100 und M3015.0250) > oder als Mix (M3016.1010) > oder unseren DNA-Markern > und unserer günstigen Standardagarose > bieten wir Ihnen weitere Produkte für die PCR.

qPCR LyoMix - Lyophilisierter, temperaturstabiler, vorgemixter Hotstart Mastermix mit allen notwendigen Komponenten für Ihre Probe Realtime PCR (optimierter Puffer, dNTPs, Hotstart Taq) für schwierige Templates, qPCR und Multiplex Applikationen. Keine Kühlung/Kühlkette notwendig! Der LyoMix und alle Inhaltsstoffe sind bei ungeöffnetem Tube bei Raumtemperatur für mindestens 2 Jahre haltbar! Unseren lyophilisierten Mastermix erhalten Sie auch vorportioniert als LyoBalls in PCR-Tube-Strips oder in PCR-Platten (M3069 > - 0,1mL tubes > oder M3070 > - 0,2mL tubes)! Die Verwendung unserer Hotstart Polymerase garantiert, dass es vor dem ersten Denaturierungszyklus in der PCR nicht zur Amplifikation von Primer-Dimeren und anderen Artefakten kommen kann. Dadurch ist vor allem eine hohe Spezifität aber auch Sensitivität gegeben. Durch die erhöhte Sensitivität werden auch die Ergebnisse bei Multiplex Applikationen besser. Ideal für qPCR Anwendungen geeignet. Dieser lyophilisierte Mastermix in Pulverform oder in Form von einfach zu handhabenden Beads ist die perfekte Wahl, wenn es um ein schnelles Setup gehen sollte, da hiermit viele Pipettierschritte nicht mehr benötigt werden. Einfach den Mastermix mit PCR-grade Wasser, Template und Primern rekonstitutionieren und fertig. Testmuster zum Sonderpreis erhältlich! Keine Versandkosten bei Versand innerhalb Deutschlands! Der Testmusterpreis wird bei der ersten offiziellen Bestellung des Produkts zurückerstattet. Lyophilisierter realtime PCR Mastermix: Hotstart Polymerase erhöhte Spezifität erhöhte Sensitivität für schwierige Templates mit hohem GC-Gehalt geeignet für Multiplexapplikationen empfohlen für qPCR geeignet mit dNTPs Beachten Sie auch unseren SuperHot Hotstart Mastermix > mit und ohne Farbstoff. Mit unseren hochwertigen dNTPs als Set > (M3015) oder als Mix (M3016.1010) > oder unseren DNA-Markern > und unserer günstigen Standardagarose > bieten wir Ihnen weitere Produkte für die PCR.

LyoBalls enthalten: HotStart DNA-Polymerase, optimierter Reaktionspuffer sowie unsere qualitativ hochwertigen dNTPs. Sie können innerhalb von Sekunden mit PCR-Wasser rehydriert werden und sind dann sofort fertig zum Einsatz in der PCR. Es müssen lediglich Primer, Probes und Template zugegeben werden. Auch für schwierige Templates, qPCR und Multiplex Applikationen. Der lyophilisierte Mastermix wird in einer breakable 96-well PCR-Platte geliefert. Die Platte ist in einzelne "8'er Streifen" teilbar. Somit haben Sie die Variabilität kleinere oder größere Ansätze, je nach Bedarf zu fahren. Für unsere LyoBalls wird keine Kühlung/Kühlkette mehr benötigt! Der lyophilisierte Mastermix ist im ungeöffneten Zustand bei Raumtemperatur für mindestens 24 Monate stabil. Keine Kühlung/Kühlkette notwendig! Die LyoBalls und alle Inhaltsstoffe sind bei ungeöffnetem Tube bei Raumtemperatur für mindestens 2 Jahre haltbar! Die Verwendung unserer Hotstart Polymerase garantiert, dass es vor dem ersten Denaturierungszyklus in der PCR nicht zur Amplifikation von Primer-Dimeren und anderen Artefakten kommen kann. Dadurch ist vor allem eine hohe Spezifität aber auch Sensitivität gegeben. Durch die erhöhte Sensitivität werden auch die Ergebnisse bei Multiplex Applikationen besser. Ideal für qPCR Anwendungen geeignet. Lyophilisierter realtime PCR Mastermix:• Hotstart Polymerase • increased specificity • increased sensitivity • for difficult to amplify templates with high GC content• for Multiplex applications • for qPCR • ready-to-use Unser lyophilisierter qPCR Probe Mastermix ist auch als Pulver erhältlich (LyoMix, M3071 >). Mit unseren qualitiativ hochwertigen dNTPs (dNTPs as Set > oder als Mix >) oder unseren DNA-Leitern und der  or our DNA Ladders > sowie unserer günstigen Standardagarose (M3044 >) können wir unseren Kunden weitere Produkte für die PCR anbieten.

LyoBalls enthalten: HotStart DNA-Polymerase, optimierter Reaktionspuffer sowie unsere qualitativ hochwertigen dNTPs. Sie können innerhalb von Sekunden mit PCR-Wasser rehydriert werden und sind dann sofort fertig zum Einsatz in der PCR. Es müssen lediglich Primer, Probes und Template zugegeben werden. Auch für schwierige Templates, qPCR und Multiplex Applikationen. Der lyophilisierte Mastermix wird in einer breakable 96-well PCR-Platte geliefert. Die Platte ist in einzelne "8'er Streifen" teilbar. Somit haben Sie die Variabilität kleinere oder größere Ansätze, je nach Bedarf zu fahren. Für unsere LyoBalls wird keine Kühlung/Kühlkette mehr benötigt! Der lyophilisierte Mastermix ist im ungeöffneten Zustand bei Raumtemperatur für mindestens 24 Monate stabil. Keine Kühlung/Kühlkette notwendig! Die LyoBalls und alle Inhaltsstoffe sind bei ungeöffnetem Tube bei Raumtemperatur für mindestens 2 Jahre haltbar! Die Verwendung unserer Hotstart Polymerase garantiert, dass es vor dem ersten Denaturierungszyklus in der PCR nicht zur Amplifikation von Primer-Dimeren und anderen Artefakten kommen kann. Dadurch ist vor allem eine hohe Spezifität aber auch Sensitivität gegeben. Durch die erhöhte Sensitivität werden auch die Ergebnisse bei Multiplex Applikationen besser. Ideal für qPCR Anwendungen geeignet. Lyophilisierter realtime PCR Mastermix:• Hotstart Polymerase • increased specificity • increased sensitivity • for difficult to amplify templates with high GC content• for Multiplex applications • for qPCR • ready-to-use Unser lyophilisierter qPCR Probe Mastermix ist auch als Pulver erhältlich (LyoMix, M3071 >). Mit unseren qualitiativ hochwertigen dNTPs (dNTPs as Set > oder als Mix >) oder unseren DNA-Leitern und der  or our DNA Ladders > sowie unserer günstigen Standardagarose (M3044 >) können wir unseren Kunden weitere Produkte für die PCR anbieten.