X-β-D-Glucosid / X-Glu

X-Gal (5-Brom-4-chlor-3-indolyl-β-D-galactopyranosid) findet Verwendung in der Identifizierung von lacZ+ Bakterien, speziell zum Nachweis von β-Galactosidase, die von rekombinanten Vektoren exprimiert wird. X-Gal wird häufig in Verbindung mit IPTG > (zur Induktion des lac-Promotors (lac-Operon), zum Screening von blauen Kolonien verwendet. Es wird auch für das Screening von β-Galactosidase-Reportergen-Aktivitäten in Transfektionen von eukaryotischen Zellen verwendet. Funktionsprinzip:X-Gal ist ein Substrat der β-Galactosidase, die durch Spaltung des Substrates 5-Brom-4-chlor-3-indoxyl (X) freisetzt. Das enzymatisch abgespaltene Indoxyl wird zum unlöslichen Indigo oxidiert. Als Stammlösung kann z.B. eine 20mg/mL X-Gal-Lösung in Dimethylformamid angesetzt werden. Für die Verwendung in LB/Amp. - Platten wird diese Stammlösung 1 : 1000 (Endkonz. 20μg/mL) oder 1 : 500 (Endkonz. 40μg/mL) verdünnt. Das erhitzte Medium sollte dabei auf ca. 50°C heruntergekühlt sein. Die Menge an eingesetztem X-Gal kann reduziert werden, wenn eine X-Gal-Lösung in DMF auf die Agar-Platten (bereits mit Bakterienkolonien!) aufgesprüht wird. Synonyme: X-Gal; XGal; 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactopyranoside; 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactoside; 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl beta-D-galactoside; BCIG; X-beta-Gal

X-alpha-D-Gal ist ein chromogenes Substrat für Hefe alpha-Galactosidase (MEL1) und wird benutzt, um GAL4-basierte Hefe Two-Hybrid-Interaktionen direkt in Agarplatten zu detektieren. X-alpha-D-Gal wird zur Differenzierung von Arten innerhalb der Enterobacteriaceaefamilie und zur Differenzierung von Bifidobacteria und Lactobacillusarten benutzt (siehe Referenzen). Synonyme: 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl a-D-galactopyranoside, X-alpha-Gal; X-alpha-Gal.  Andere Produkte die als Substrat der alpha oder beta-Galactosidase dienen: M3225: 5-Bromo-3-indolyl-beta-D-galactopyranoside >M3204: 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-galactopyranoside (X-Gal) >M3205: 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl-ß-D-glucopyranoside (X-Glu / X-Glc) > Referenzen:1. Aho S., Arffman A., Pummi T., Uitto J., A novel reporter gene MEL1 for the yeast two-hybrid system. Anal Biochem. 1997, 253, 270-2. 2. Chevalier P., et al., X-alpha-Gal-base medium for simultaneous enumeration of bifidobacteria and lactic acid bacteria in milk. J. Microbiol. Methods 1991, 13, 75. 3. Gossrau R., Lojda Z., Histochemical detection of alpha-D-galactosidase with 5-Br-4-Cl-3-indoxyl alpha-D-galactoside. Acta Histochem. 1989, 85, 213-22. 4. Perry J.D., Ford M., Taylor J., Jones A.L., Freeman R., Gould F.K., ABC medium, a new chromogenic agar for selective isolation of Salmonella spp. J. Clin. Microbiol. 1999, 37, 766-8.