CentriPure Dye Terminator - 96-well Platten

Das PureIT ExoZAP - PCR Clean-Up Reagenz von Ampliqon kann zur enzymatischen Aufreinigung von PCR-Reaktionen verwendet werden, ohne dass DNA-Reinigungssäulchen benötigt werden. Mit PureIT ExoZAP gereinigte Proben sind sofort nach einer einfachen 5-minütigen Inkubationszeit bereit für den Einsatz in nachgeschalteten Anwendungen wie DNA-Sequenzierung oder SNP-Analyse (Einzelnukleotid-Polymorphismus). Mit PureIT ExoZAP können PCR-Produkte von <100bp bis 20kbp von Primern und überschüssigen dNTPs befreit werden - ganz ohne Probenverlust! Die Kombination aus HL-ExoI und rekombinanter Shrimp Alkalischer Phosphatase (rSAP) hydrolysiert überschüssige Primer und Nukleotide in einem einzigen Schritt und lässt nur die amplifizierte DNA übrig. Vorteile:• Schnell. 5-Minuten-Protokoll• Einschrittprotokoll ohne Zentrifugation• Nur ein Pipettierschritt für saubere DNA-Sequenzierungsproben• Einfaches Entfernen von überschüssigen Primern und nicht eingebauten Nukleotiden• Minimierung des Probenverlusts. Bis zu 100% Rückgewinnung des Probenmaterials Das innovative PureIT ExoZAP bietet die einfachste Möglichkeit zur schnellen Reinigung von PCR-Reaktionen. Nur ein Pipettierschritt, gefolgt von einem Inkubationsschritt bei 37°C für mind. 2 Minuten (Verdau), gefolgt von einem Inkubationsschritt bei 80°C für ca. 3 (-10) Minuten (Deaktivierung der Enzyme). Sie können Ihren PCR-Cycler direkt nach der PCR entsprechend programmieren, die PureIT ExoZAP Reaktionslösung in die Tubes pipettieren, den Cycler neu starten und nach nur 5 Minuten sind Ihre gereinigten Proben fertig für die Sequenzierung oder SNP-Analytik, zum Beispiel mit unserer SNP Pol DNA-Polymerase >! Mit PureIT ExoZAP besteht die Möglichkeit, nach der BigDye™ Cycle Sequencing-Reaktion praktisch direkt zu sequenzieren, ohne dass zusätzliche, zeitaufwändigere Reinigungschritte mit, z.B. Dye Terminatore Purification kits durchgeführt werden müssen. PureIT ExoZAP PCR CleanUp verbessert die Qualität der DNA-Sequenzierung signifikant Ein PCR-Produkt von 866 bp Länge wurde mittels der Ampliqon TEMPase-DNA-Polymerase in Ammoniumpuffer amplifiziert. Das PCR-Produkt wurde mit dNTPs und Primern versetzt und dann (A) ohne PureIT ExoZAP PCR CleanUp (B) mit PureIT ExoZAP PCR CleanUp (2 +3 min) und (C) mit einem enzymatischen PCR-Reinigungsreagenz eines Konkurrenzprodukts behandelt (1+ 4 min) vor der Sanger-Sequenzierung. Alle Proben wurden dreifach und gemäß den Empfehlungen des Herstellers analysiert. Das Ergebnis der Sanger-Sequenzierung wurde durch grafische Darstellung der Anzahl der Basenaufrufe mit bestimmten Qualitätswerten (Phred-Score) verglichen. Die Behandlung von PCR-Produkten mit PureIT ExoZAP verbessert die Qualität der DNA-Sequenzierung signifikant. Darüber hinaus zeigte PureIT ExoZAP PCR CleanUp PCR-Reinigungsergebnisse, die dem konkurrierenden PCR-Reinigungsreagenz entsprechen. * Daten mit Qualitätswerten unter 10 sind nicht enthalten. Ergebnisse der Sanger-Sequenzierung des 866-bp-PCR-Produkts. Die abgebildeten Elektropherogramme sind entweder nach Behandlung mit PureIT ExoZAP PCR CleanUp (oben) oder unbehandelt (unten). Die gezeigte Sequenz liegt bei ungefähr 250 - 300 Basen. Die Behandlung eines mit Spikes versehenen PCR-Produkts mit PureIT ExoZAP PCR CleanUp verbessert die Qualität der Sanger-Sequenzierung erheblich. Die Behandlung erhöht die Signalintensität und beseitigt Hintergrundstörungen und Basen-Miscalls.