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Tosyl-L-lysinchloromethylketon Hydrochlorid (TLCK) ist ein irreversibler, spezifischer Inhibitor von Trypsin und inhibiert auch die Thrombin-like Protease Cerastocytin. Chymotrypsin wird durch TLCK nicht inhibiert. Das pH Optimum für die Inhibition durch Histidinmodifikation liegt bei pH 7,5. Chymotrypsinogen wird durch TLCK nicht inhibiert. Eine Konzentration von 50µg/mL TLCK inhibiert 100% der trypsin-like Proteinaseaktivität von Weizensamenextrakten. Neben Proteasen werden auch Proteinkinasen durch TLCK inhibiert. Offensichtlich durch die Modifikation der enzymatischen Aktivitätszentren der Proteinkinasen. TLCK Lösungen sind am stabilsten bei pH 6,0 und +2°C bis +8°C. TLCK ist bei pH-Werten über 7,0 nicht stabil. Daher werden konzentrierte Lösungen von 1mg/mL bis 20mg/mL mit Pufferlösungen von pH <6,0 angesetzt. Lösungen immer kurz vor dem Inhibitionsexperiment pipettieren. Arbeitskonzentrationen sind: 50µg/mL to 100µg/mL. Weitere Inhibitoren finden Sie hier: Inhibitoren >: Pepstatin A >, AEBSF >, Aprotinin >, Leupeptin >, TLCK >, PMSF >, Bestatin > oder Diisopropylphosphorofluoridat (DFP) >.

Beschreibung Aprotinin wird hauptsächlich aus Rinderlunge gewonnen. Aprotinin besteht aus 58 Aminosäuren von 6511 Da und ist sehr basisch, wobei die Aminosäuren 13–18 von Aprotinin für die Bindung an Serinproteasen von besonderer Bedeutung sind. Da Aprotinin von verschiedenen Arbeitsgruppen beschrieben wurde, haben sich zwei Bezeichnungen etabliert: 1. Bovine Pancreatic Trypsin Inhibitor (BPTI) und 2. Trypsin-Kallikrein Inhibitor (TKI). Aprotinin wird häufig als unspezifischer Serinprotease-Inhibitor eingesetzt.WirkungAprotinin hemmt Proteasen wie z. B. Trypsin, Plasmin, Chymotrypsin und Thrombin. Aprotinin ist ein kompetitiver Inhibitor von Serinproteasen, der stabile Komplexe mit dem Enzym bildet und aktive Enzymstellen blockiert. Diese Bindungen sind reversibel und die meisten Aprotinin-Protease-Komplexe lösen sich bei sehr niedrigen oder hohen pH-Werten (<3 und >10) auf. VerwendungAprotinin wird im Wesentlichen als Trypsin-Inhibitor eingesetzt.Stabilität: Aprotinin kann in lyophylisierter Form bei +2°C bis +8°C für unbegrenzte Zeit gelagert werden. In Salz- oder Pufferlösungen (pH 5 - 8) ist Aprotinin mindestens einen Monat bei +2°C bis +8°C oder mehrere Jahre bei -20°C stabil. Stammlösungen (z. B. 10mg/mL) sollten in kleinen Aliquots eingefroren und nur einmal verwendet werden, damit sie nicht wiederholt eingefroren und aufgetaut werden müssen.Einheitendefinition Eine Trypsin-inhibitorische Einheit (TIU) hemmt die Aktivität von 2 Trypsin-Einheiten um 50%, wobei eine Trypsin-Einheit 1 μmol Nα-Benzoyl-DL-arginin-p-nitroanilid (BAPNA) pro Minute bei pH 7,8 und 25°C hydrolysiert. Dabei entspricht 1 TIU (Trypsin-inhibitorische Einheit) ca. 1300 KIU (Kallikrein-inhibitorische Einheiten) und 1 TIU entspricht einer Ph. Eur.-Einheit.

Tosyl-L-phenylalaninchloromethylketon (TPCK) ist ein irreversible, spezifischer Inhibitor für Chymotrypsin und inhibiert Thrombin-like Proteasen wie Cerastocytin. Trypsin wird nicht inhibiert. Das pH Optimum für die Inhibierung durch Alkylierung von Chymotrypsin mittels TPCK liegt bei pH7,2. Chymotrypsinogen wird durch TPCK nicht inhibiert. Die bakterielle Serinproteasen Re, Fa und So aus E.coli werden vollständig durch 0,5 bis 1 mM TPCK inhibiert. TPCK wird bei der Herstellung von chymotrypsinfreiem Trypsin benutzt. TPCK Lösungen sind bei pH-Werten unterhalb 7,0 bei RT stabil. Nichtsdestotrotz wird empfohlen die Lösungen bei +2°C bis +8°C zu lagern. TPCK ist bei pH-Werten oberhalb 7,0 instabil. Konzentrierte Lösungen von 3mg/mL bis 20mg/mL werden in Ethanol oder Methanol angesetzt. Arbeitskonzentration: 10µg/mL bis 100µg/mL. Weitere Inhibitoren finden Sie hier: Inhibitoren >: Pepstatin A >, AEBSF >, Aprotinin >, Leupeptin >, TLCK >, PMSF >, Bestatin > oder Diisopropylphosphorofluoridat (DFP) >.

L-Methionine sulfoximine is a potent inhibitor of glutamine sythetase activity, that is widely used as a selection agent for plasmid integration in Chinese hamster ovary (CHO) and other mammalian cell lines. The growing demand for high yield cell banks for production of recombinant proteins for therapeutics has resulted in two major systems for selection of stable and active clones, Methotrexate selection of dihydrofolate reductase (DHFR) overexpressing cells and MSX selection of glutamine synthetase overexpressing cells. Cells are grown in the absence of glutamine in the media and inhibition of the endogenous activity of glutamine synthease results in cell death for cells lacking overexpression. The MSX-glutamine synthase selection mechanism provides benefits over that of the Methotrexate-DHFR system in that it typically requires a single amplification step and results in significant reduction of time to produce high stability, highly amplified clones. Methionine sulfoximine (MSX) increases ornithine decarboxylase activity, decreases the survival rate in a model of transient cerebral ischemia, and inhibits glutamine synthetase activity. Weitere Inhibitoren finden Sie hier: Inhibitoren >: Pepstatin A >, AEBSF >, Aprotinin >, Leupeptin >, TLCK >, PMSF >, Bestatin > oder Diisopropylphosphorofluoridat (DFP) >.

Der Protease Inhibitor Mix V für Gewebextrakte ist eine spezielle Protease-Inhibitorenmischung von 6 Proteaseinhibitoren mit einer breiten Wirkspektrum gegen Aspartat,- Cystein-, Serin-, Metalloproteasen, wie auch gegen Aminopeptidasen. Der Mix wurde speziell für Extrakte aus tierischem Gewebe optimiert, kann aber auch bei anderen Extrakte benutzt werden. Die Mischung ist frei von EDTA und enthält die folgenden Inhibitoren: AEBSF >, Aprotinin >, E-64 >, Leupeptin >, Bestatin >, Pepstatin A >. Der Kit wird zusammen mit 1mL ultrareinem DMSO geliefert. Der Inhalt eines Vials in 1mL DMSO gelöst ergibt ein 100-fach Konzentrat das für die Behandlung von 100mL Tissue-Extrakt (aus Säugerzellen) ausreicht. Wirkspektrum:AEBSF wirkt gegen Serinproteasen. Aprotinin wirkt gegen Serinproteasen. E-64 wirkt gegen Cysteinproteasen. Leupeptin wirkt gegen Cysteinproteasen und trypsinähnlichen Serinproteasen, Bestatin wirkt gegen Aminopeptidase B und Leucinaminopeptidase. Peptstatin A wirkt gegen Asparaginsäureproteasen. Bestatin wirkt gegen Aminopeptidase B und Leucinaminopeptidase und EDTA inhibiert Metalloproteasen. Weitere Proteaseinhibitorenmixe von Genaxxon finden Sie hier: - Protease Inhibitor Mix I > (allgemeine Anwendungen, enthält kein EDTA)- Protease Inhibitor Mix II >(allgemeine Anwendungen, enthält EDTA)- Protease Inhibitor Mix III > (speziell für bakterielle Extrakte, enhält EDTA)- Protease Inhibitor Mix IV > (speziell für pflanzliche Extrakte, enthält kein EDTA)- Protease Inhibitor Mix V > (speziell für tierische Extrakte, enthält kein EDTA) Weitere Inhibitoren finden Sie hier: Inhibitoren >: Pepstatin A >, AEBSF >, Aprotinin >, Leupeptin >, TLCK >, PMSF >, Bestatin > oder Diisopropylphosphorofluoridat (DFP) >.