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Produktinformationen "Ni-IDA Agarose für His-tagged Proteine"
Nickel-beladene Agarosen sind die am häufigsten eingesetzten Produkte zur effizienten Aufreinigung von 6-fach Histidin-getaggten rekombinanten Fusionsproteinen. Die Ni2+-Ionen weisen eine hohe Affinität zu 6-fach Histidin-getagten Fusionsproteinen auf und führen zu sehr hohen Rohausbeuten bei der Aufreinigung dieser Fusionsproteine aus den Lysaten. Wird jedoch aus Lysaten aufgereinigt, die auch Fremdproteine mit wiederkehrenden Histidin- Anteilen in den Ketten enthalten, so nimmt die Selektivität gegenüber den 6-fach Histidin-getagten Fusionsproteinen ab, da zunehmend auch nicht-getagte Histidin-enthaltende Proteine an die Ni-IDA-Agarose binden. In diesem Fall empfiehlt sich die Verwendung von Genaxxon Co-IDA-Agarose (Kat.-Nr. S5370), die eine weit höhere Selektivität gegenüber 6-fach Histidin-getagten Fusionsproteinen aufweist.
Genaxxon Ni-IDA-Agarose zeichnet sich durch hohe chemische Stabilität sowie durch die einfache Möglichkeit aus, die Aufreinigung direkt aus den Rohlysaten durchzuführen. Die Genaxxon Ni-IDA-Agarose kann darüber hinaus mehrfach mit Nickelsulfat-Lösung regeneriert und wieder eingesetzt werden.
Ni-IDA-Agarose - Der effiziente, aber günstige Weg zur Aufreinigung von 6x Histidin-getagten Fusionsproteinen.
Highlights:
- ideal geeignet für Grafity-Flow- und Batch-Verfahren
- Kein teures Aufreinigungssystem notwendig
- konsistente Leistungsfähigkeit
- für native wie auch denaturierende Bedingungen
- Extrem kostengünstig (Volumenangaben entsprechen den Agarosemengen)!
Die Genaxxon Ni-IDA Agarose besteht aus quervernetzter Agarose, an die mit Ni2+-Ionen beladene Iminodiessigsäure (IDA) kovalent gebunden ist. Bindungskapazität bis zu 50mg 6xHistidin-getagtes Fusionsprotein pro mL Agarose.
Die Ni-IDA Agarose wird als eine gepufferte 50% Suspension mit 20% Ethanol geliefert.
Specifications
cross-linked Agarose
particle size: 32-60µm
binding capacity: 50mg/mL resin
max pressure: 3 bar (43 psi)
pH-stability: 2-14 (short term)
pH-stability: 3–12 (long term)
flow rates: 0.5-2.0mL/min (normally) up to 6.0mL/min possible
stable against: 100% MeOH, 100% EtOH, 8M Urea, 6M Guanidinium hydrochloride, 30% (v/v) Acetonitrile
Applikation:
for purification of recombinant proteins for purification of His-tagged proteinsQuelle:
syntheticKlassifizierungen:
Dokumente:
SicherheitsdatenblätterProtokolle
Zertifikate
Datenblätter
Allg. Daten 1
Quelle: NCBI PubMed
Hier finden Sie Artikel und Literaturzitate, in denen die Autoren auf die hohe Qualität dieses Genaxxonprodukts vertrauen.
Listed below are articles and references, in which the authors trust in the high quality of this Genaxxon product.
Quelle/Source:NCBI PubMed >
Pavel Bashtrykov, Gytis Jankevicius, Renata Z. Jurkowska, Sergey Ragozin, Albert Jeltsch
J Biol Chem. 2014 Feb 14; 289(7): 4106–4115. Published online 2013 Dec 24. doi: 10.1074/jbc.M113.528893
PMCID: PMC3924276
Accessory Items
Protein purification based on magnetic beads has become popular because they are useful to extract proteins from diluted solutions, such as cell culture supernatants purify proteins expressed at low levels perform pull-down experiments We use magnetic beads with a ferrimagnetic core and an agarose coating coupled to a ligand of choice, our beads meet our own high quality standards. They enable fast and easy purification steps, which can be automated. The amount of magnetic beads used for a purification setup can be easily scaled up and down to match protein expression rates and culture volumes. Genaxxon MagBeads are ferrimagnetic agarose beads coupled to a chelating ligand (IDA or NTA) coordinating nickel or cobalt ions. All offered ligand-metal systems efficiently bind histidine-tagged proteins. With a binding capacity of up to 40mg protein per mL (Ni-IDA) and 70mg per mL (Ni-NTA) of settled MagBeads, Genaxxon Ni-IDA MagBeads are comparable to equivalent beads from alternative providers.
Genaxxon bietet gebrauchsfertige Ni2+ IDA Säulchen für die His-tag Proteinaufreinigung im Gravity-Flow-Verfahren an. Damit ist ein schneller Aufreinigungsprozess mit hoher Ausbeute an Zielprotein verfügbar ohne lästiges Packen zur Verfügung stehender Leersäulen. Es werden beide Matrices, Ni2+- wie auch Co2+-IDA-Agarose, mit zwei verschiedenen Füllbettvolumina (1mL, 5mL) als 20% ethanolische Suspension angeboten. Frittenporengröße 20 µm - Agarose 6% quervernetzte Agarose (Sepharose®CL-6B) - Matrixstabilität in allen für die Proteinaufreinigung üblichen Reagenzien - Aktivierungsagenz Epichlorhydrin - Bettvolumen: Agarose 1mL (für L-Säulen), 5mL (für XL-Säulen) - Kapazität ca. 28 µmol Ni2+/mL Gel, ca. 25 µmol Co2+/mL Gel.
Protein purification based on magnetic beads has become popular because they are useful to extract proteins from diluted solutions, such as cell culture supernatants purify proteins expressed at low levels perform pull-down experiments We use magnetic beads with a ferrimagnetic core and an agarose coating coupled to a ligand of choice, our beads meet our own high quality standards. They enable fast and easy purification steps, which can be automated. The amount of magnetic beads used for a purification setup can be easily scaled up and down to match protein expression rates and culture volumes. Genaxxon MagBeads are ferrimagnetic agarose beads coupled to a chelating ligand (IDA or NTA) coordinating nickel or cobalt ions. All offered ligand-metal systems efficiently bind histidine-tagged proteins. With a binding capacity of up to 40mg protein per mL (Ni-IDA) and 70mg per mL (Ni-NTA) of settled MagBeads, Genaxxon Ni-IDA MagBeads are comparable to equivalent beads from alternative providers.
Ni-NTA-Agarose wurde für die Affinitätsreinigung von Proteinen entwickelt, die eine Polyhistidin-Markierung tragen. Diese Affinitätschromatographie-Matrix basiert auf BioWorks-Workbeads, die aus 7,5% vernetzter Agarose bestehen. Das Material ist hochporös, um eine optimale Proteininteraktion zu ermöglichen. Vernetzte Agarose ist auch physikalisch sehr stabil und eignet sich für Reinigungsprozesse unter niedrigem Druck mit Flussraten von bis zu 6mL/min (optimal 0,5 - 2mL/min). Unsere Ni-NTA-Agarose hat eine sehr homogene Größe mit einem mittleren Partikeldurchmesser von 40μm, was zu einem hohen Grad an Reproduzierbarkeit zwischen einzelnen Reinigungsdurchläufen führt. Ni-NTA-Agarose besteht aus quervernetzter Agarose, an die mit Ni2+-Ionen beladene tetradendritische Nitrilotriessigsäure (NTA) kovalent gebunden ist. Die Bindungskapazität variiert mit den unterschiedlichen Proteinen aufgrund deren spezifischen Eigenschaften, wobei sie aber mindestens bei 50mg Zielprotein pro mL Agarose-Gel liegt. Das Harz ist bestens geeignet für die Einsatzbereiche Batch-, Spin- und Säulenverfahren jeglichen Maßstabs und bietet mit einer sehr homogenen Größenverteilung um einen mittleren Partikeldurchmesser von 40µm einen hohen Grad an Reproduzierbarkeit zwischen einzelnen Reinigungsansätzen. Die Ni-NTA Agarose wird als gepufferte Suspension in 50% Ethanol geliefert. So entsprechen, z.B. 1x S5377.0010 20mL einer Suspension aus 10mL Resin und 10mL Wasser mit 20% EtOH.